Роль химиопрепаратов в образовании устойчивых популяций микобактерий туберкулеза

Аннотация

Целью работы являлась селекция под воздействием противотуберкулезных пре­паратов вариантов микобактерий туберкулеза с измененной лекарствённой устойчи­востью. Лабораторный штамм H₃₇R_V селекционировали путем 15 пассажей одной колонии на твердой среде Левенштейна — Йенсена. В полученном генетически одно­родном варианте микобактерий на 10¹² особей не оказалось ни одной, устойчивой к рифампицину, изониазиду, стрептомицину, этионамиду и этамбутолу.

Полный текст

Из исходного генетически однородного штамма были получены его- варианты, моноустойчивые к 50 и 500 мкг/мл рифампицина, 10 и 500 мкг/мл изониазида, 20 и 500 мкг/мл стрептомицина, 10 и 100 мкг/мл этамбутола и 50 и 100 мкг/мл этионамида. Селекцию проводили на питательных средах Левенштейна — Йенсена и Фин­на II с возрастающими концентрациями каждого из противотуберкулезных средств, начиная с суббактериостатических. Резистентность ко всем препаратам быстрее развивалась на среде Финна II. Необходимая степень устойчивости была получена’ в течение года. Для получения относительно низкорезистентных вариантов требова­лось 6—14 пассажей, а для высокорезистентных—15—22 пассажа. Морфология бак­терий и характер их роста на твердых и жидких питательных средах были одина­ковы у чувствительного и у устойчивых вариантов. Ниациновый тест показал, что- эта реакция положительна как у исходного чувствительного варианта, так и у ре­зистентных. Редукция нитратов также протекала одинаково.

Вирулентность изучали на 120 белых мышах весом 18—20 г, которые были раз­делены на 12 групп и заражены в боковую вену хвоста чувствительным и 10 устойчивыми вариантами микобактерий туберкулеза. Еще 10 мышей заражали штаммом, выделенным от больного и чувствительным ко всем препаратам. Культуры туберку­лезных микобактерий вводили в дозе 0,1 мг сухого вещества, разведенного в 0,5 мл физиологического раствора.

В группе животных, зараженных культурой от больного, у 40% в течение пер­вого месяца наступил летальный исход. Лабораторные клонированные культуры име­ли отличия в вирулентности. К концу третьего месяца после заражения смертность- в каждой из групп не превышала 10%.

Четкое снижение вирулентности по сравнению с исходным генетически однород­ным вариантом H₃₇R _ѵ было обнаружено у высокорезистентных к изониазиду мико­бактерий туберкулеза.

Результаты работы показали возможность селекционирования устойчивых к раз­личным противотуберкулезным препаратам вариантов микобактерий туберкулеза пу­тем последовательных пассажей на питательных средах, содержащих химиотерапевтические средства. Резистентные варианты лабораторного штамма сохраняют видоспецифичность.