Influence of inhibition of contact activation on the stability of hemocoagulation and fibrinolysis factors during storage of donor blood

Abstract

Donated blood with a shelf life of more than 1-2 days in some cases can cause hypocoagulation in the recipient due to the presence of a preservative, a decrease in the number of platelets, the activity of factors V, VIII and fibrinogen.

Full Text

Донорская кровь со сроком хранения более 1—2 сут в ряде случаев, может вызывать гипокоагуляцию у реципиента вследствие наличия консерванта, снижения в ней количества тромбоцитов, активности факторов V, VIII и фибриногена. Ранее мы показали, что при обработке плазмы крови высокоспецифичным ингибитором фактора ХНа из кукурузы происходит значительное замедление контактно активированного фибринолиза и ингибирование процесса холодовой активации фактора VII. Поэтому в настоящей работе была поставлена цель изучить возможность предотвращения потребления плазменных факторов свертывания крови при хранении путем ингибирования фактора XI 1а и плазменного калликреина.

Свежезаготовленная кровь от 10 -доноров обоего пола была получена в день начала опыта на Республиканской станции переливания крови М3 ТАССР. В качестве гсМоконсерванта использовался глюгйцир. После центрифугирования при 750g в течение 10 мин и при 2150g в течение 20 мин объединяли бестромбоцитную плазму от разных доноров. Для ингибирования механизмов контактной активации применяли препарат кукурузного ингибитора фактора ХПа в концентрации 0,25 мг/мл и контрикал, являющийся ингибитором калликреина, в концентрации 1500 ед./мл. Одновременно инкубировали и тестировали 3 вида плазмы: без ингибиторов (контроль), с контрикалом, с кукурузным ингибитором. В плазме консервированной крови на сроках 1, 2, 3, 5, 7, 10, 15, 21 и 30 дней определяли содержание фибриногена спектрофотометрически, факторы V, VII—X в комплексе по Оурену; фибринолитическую активность, стимулируемую стрептокиназой. Опытные образцы плазмы хранили в течение опыта при температуре 3—4° в силиконированной посуде. Всего за время месячной инкубации было выполнено 550 определений факторов V, VII—X и 250 — содержания фибриногена и фибринолитической активности.

Содержание фибриногена за 30 дней инкубации не изменилось и составляло в среднем 2,05+0,04 г/л в контроле, 2Д4±0,07 г/л — в плазме с контрикалом, 2,13+0,08 г/л — с кукурузным ингибитором. Разница в содержании фибриногена в различных образцах плазмы недостоверна.

Фибринолитическая активность, стимулируемая стрептокиназой, также оставалась постоянной в течение всего времени йаблюдения в контрольной плазме и в плазме с кукурузным ингибитором. Лизирования эуглобулиновых сгустков из плазмы с контрикалом не зарегистрировано ни в одном из опытов, по всей видимости, вследствие прямого ингибирования плазмина. Лизис в контроле происходил несколько медленнее (11,8+0,6 мин), чем в случае плазмы с кукурузным ингибитором фактора ХПа (9,1+0,5 мин, Р<0,05).

Величины активности факторов V и VII—X в плазме при хранении представлены в табл. 1 и 2. Быстрое и значительное падение их активности в плазме консервированной крови не связано с присутствием ингибитора фактора ХПа или плазменного калликреина.

Таблица 1

Активность фактора V в различных образцах плазмы при хранении, %

Образцы тестируемой плазмы	Срок инкубации, дни
	1-й	3-й	7-й	21-й	30-й
Контрольная плазма . Плазма+контрикал . Плазма + кукурузный ингибитор , . Активность факторо	'66,9±3,0 53,4+3,0 55,1+4,9 в VII—X в	25,7+5,4 25,6+3,7 27,5+4,3 различных (	13,6+2,0 16,2±1,8 16,9+2,6 образцах пла	7,1 + 1,1 13,2+2,2 3,9+0,7 Т змы при хр	5,5±0,7 7,4±0,7 3,9+0,3 ' а б л и ц а 2 анении, %
Образцы тестируемой плазмы	Срок инкубации, дни
	1-й	3-й	7-й	15-Й	21-й
Контрольная плазма  Плазма+контрикал  Плазма + кукурузный ингибитор	104,5+21,6 91,1+21,2 94,2+26,6	37,3+1,9 33,7+5,7 34,1+6,2	34,3+4,7 26,0+2,3 24,6+1,8	21,5+1,1 18,3+0+ 12,5±0,7	18,5+1,5 16,1 + 1,0 16,6+0,8

Полученные нами результаты подтверждают данные о снижении содержания факторов V и VII при хранении консервированной крови. В то же время количество фибриногена и плазминогена в плазме заметно не изменилось. Ингибирование инициальных факторов гемокоагуляционного каскада непосредственно в плазме в условиях ограниченного контакта не позволяло увеличить стабильность факторов V, VII—X. Падение их активности при хранении обусловлено, по-видимому, денатурацией.