Циркулирующие опухолевые клетки и их связь с клинико-морфологическими характеристиками колоректального рака

Полный текст

Несмотря на длительную историю изу­чения и совершенствования методологических подходов [1], вопрос об участии циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) в прогрессировании злокачественного процесса остаётся актуальным до настоящего времени.

В исследованиях показана связь числа ЦОК с метастатическим потенциалом при колоректальном раке. Так, S.J. Cohen и соавт. [2] при проспективном исследовании 430 больных метастатическим раком толстой кишки до лечения, после 1-го, 2-го и 3-го курсов химиотерапии установили порог позитивности в три ЦОК (метод CellSearch™).

По данным исследования О.И. Кита и соавт. [3], была выявлена связь повышенного уровня ЦОК и раннего метастазирования (в первые 18–24 мес) при колоректальном раке. Также была показана прямая связь уровня ЦОК с поражением лимфатических узлов и стадией заболевания при колоректальном раке, при этом частота обнаружения ЦОК была выше в группе больных с наличием лимфогенных метастазов (50,0 против 21,0%) [4]. При содержании ЦОК более пяти в 7,5 мл крови и наличии мутации гена KRAS, определяющего лимфогенное метастазирование злокачественных опухолей толстой кишки [5, 6], метастазирование при раке толстой кишки отмечено в 100% случаев [7].

В связи с вышесказанным целью было исследовать зависимость числа ЦОК в периферической крови у больных колоректальным раком от клинико-морфологических характеристик основного заболевания.

В исследование был включён 91 пациент с верифицированным метастатическим колоректальным раком Т3–4N1–2М1. Среди больных были 50 (54,9%) женщин и 41 (45,1%) мужчина. Средний возраст составлял 61,5±1,7 года. Опухоль локализовалась в прямой кишке у 45,1% больных, в сигмовидной кишке — у 22,9%, в правой половине ободочной кишки — у 17,7% пациентов, в левой половине ободочной кишки — у 9,7%, в поперечной ободочной кишке — у 4,6% больных.

Пациенты были распределены по группам в зависимости от вида хирургического вмешательства. Основную группу составили больные, которым проводили лапароскопическое хирургическое лечение (n=44), контрольную группу — больные, которым было проведено хирургическое вмешательство открытым доступом (n=47).

Исследования выполняли в соответствии с этическими стандартами комитета, входящего в состав учреждения.

Анализ образцов периферической крови больного на наличие ЦОК осуществляли на системе CellSearchTM с использованием набора реагентов CELLSEARCH® CTC Kit. Число выявленных ЦОК было конечным результатом. Периферическую кровь в объёме 8–10 мл забирали у больного до оперативного вмешательства.

Изучение ассоциации признаков по методу построения таблиц сопряжённости заключалось в расчёте коэффициента взаимной сопряжённости Пирсона c2 с поправкой Мантеля–Хэнзеля на правдоподобие (непараметрическая поправка), оценке статистической значимости сопряжённости и анализе тесноты ассоциации по коэффициенту взаимной сопряжённости А. Чупрова.

Полученные результаты показали, что анализ исходной взаимосвязи потенциальных факторов риска и повышения в периферической крови количества ЦОК информативен для всех больных. Однако на начальном этапе исследования мы проанализировали сопряжение между различными факторами и метастатическим потенциалом отдельно в основной и контрольной группах.

При изучении ассоциации количества ЦОК и степени дифференцировки опухолевых клеток при колоректальном раке было выявлено, что при низкой дифференцировке клеток опухоли число ЦОК в периферической крови исходно было выше. Достоверное сопряжение между степенью дифференцировки опухолевых клеток и количеством ЦОК сложилось в общем по группе, а также в контрольной группе (табл. 1, 2). Выраженное сопряжение между низкой дифференцировкой клеток опухоли и числом ЦОК в периферической крови стало продолжением этой закономерности.

У больных колоректальным раком было установлено достоверное сопряжение между размером опухоли и числом ЦОК в периферической крови до операции в основной (р=0,02) и контрольной (р=0,03) группах, в общем по группе (р=0,0009) (табл. 3, 4). Со стадией Т4 клетки приобретали более высокую подвижность и в большем объёме мигрировали в периферический кровоток.

Таблица 1. Сопряжённость степени дифференцировки опухоли и числа циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) в периферической крови до операции в основной и контрольной группах (абс.)

Степень дифференцировки	Основная группа			Контрольная группа
	Число ЦОК в крови			Число ЦОК в крови
	0	1–3	>3	0	1–3	>3
G2	1	1	1	2	1	1
G3	0	6	5	0	5	6
Итого	2	7	6	2	6	7
р (c2)	р=0,52 (c2=1,3)			р=0,04 (c2=6,4)
Коэффициент взаимной сопряжённости	0,28			0,55

Таблица 2. Сопряжённость степени дифференцировки опухоли и числа циркулирующих
опухолевых клеток (ЦОК) в периферической крови до операции в общей группе (абс.)

Степень дифференцировки	Число ЦОК в периферической крови			Всего
	0	1–3	>3
G2	3	2	2	7
G3	1	11	11	23
Итого	4	13	13	30
р (c2)	р=0,03 (c2=6,89)
Коэффициент взаимной сопряжённости	0,43

Таблица 3. Сопряжённость между размером опухоли и числом циркулирующих опухолевых
клеток (ЦОК) в периферической крови до операции в основной и контрольной группах (абс.)

Размер опухоли	Основная группа			Контрольная группа
	Число ЦОК в крови			Число ЦОК в крови
	0	1–3	>3	0	1–3	>3
Т3	2	6	1	1	4	0
Т4	0	1	5	1	2	7
Итого	2	7	6	2	6	7
р (c2)	р=0,02 (c2=7,96)			р=0,03 (c2=6,75)
Коэффициент взаимной сопряжённости	0,59			0,56

Таблица 4. Сопряжённость между размером опухоли и числом циркулирующих опухолевых
клеток (ЦОК) в периферической крови до операции в общей группе (абс.)

Размер опухоли	Число ЦОК в периферической крови			Всего
	0	1–3	>3
Т3	3	10	1	14
Т4	1	3	12	16
Итого	4	13	13	30
р (c2)	р=0,0009 (c2=14,006)
Коэффициент взаимной сопряжённости	0,564

Таблица 5. Сопряжённость между объёмом поражения лимфатических узлов и числом
циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) в периферической крови до операции в основной
и контрольной группах (абс.)

Число удалённых лимфатических узлов	Основная группа			Контрольная группа
	Число ЦОК в крови			Число ЦОК в крови
	0	1–3	>3	0	1–3	>3
≤12	1	4	2	2	4	0
>12	1	3	4	0	2	7
Итого	2	7	6	2	6	7
р (c2)	р=0,69 (c2=0,75)			р=0,009 (c2=9,44)
Коэффициент взаимной сопряжённости	0,22			0,62

Таблица 6. Сопряжённость между объёмом поражения лимфатических узлов и числом циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) в периферической крови до операции в общей группе (абс.)

Число удалённых лимфатических узлов	Число ЦОК в периферической крови			Всего
	0	1–3	>3
≤12	3	8	2	13
>12	1	5	11	17
Итого	4	13	13	30
р (c2)	р=0,02 (c2=7,51)
Коэффициент взаимной сопряжённости	0,45

Таблица 7. Сопряжённость отдалённых метастазов и числа циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) в периферической крови до операции в основной и контрольной группах (абс.)

Метастазы	Основная группа			Контрольная группа
	Число ЦОК в крови			Число ЦОК в крови
	0	1–3	>3	0	1–3	>3
M1a	2	6	0	2	5	1
M1b	0	1	6	0	1	6
Итого	2	7	6	2	6	7
р (c2)	р=0,003 (c2 =11,56)			р=0,016 (c2 =8,2)
Коэффициент взаимной сопряжённости	0,66			0,595

Таблица 8. Сопряжённость отдалённых метастазов и числа циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) в периферической крови до операции в общей группе (абс.)

Метастазы	Число ЦОК в периферической крови			Всего
	0	1–3	>3
M1a	4	11	1	16
M1b	0	2	12	14
Итого	4	13	13	30
р (c2)	р=0,0001 (c2 =19,49)
Коэффициент взаимной сопряжённости	0,628

По количеству удалённых во время операции лимфатических узлов у больных основной и контрольной групп судили об объёме их поражения. Чем обширнее был объём поражения лимфатических узлов, тем выше было число ЦОК в периферической крови, что было установлено в контрольной группе (р=0,009) и по всей группе (р=0,45) (табл. 5, 6).

В исследовании было выявлено, что наличие метастазов более чем в одном органе (M1b), связанное с разрушением ткани нескольких органов, повышало мигрирующие способности опухолевых клеток в периферическом русле (табл. 7, 8). Коэффициент взаимной сопряжённости между развитием отдалённых метастазов и числом ЦОК в периферической крови до операции был высоким и составил 0,628 (р=0,0001). Коэффициент согласия Пирсона (c2=19,49) также во много раз превышал критический уровень.

Выводы

1. Обнаружена сопряжённость числа циркулирующих опухолевых клеток с клинико-морфологическими параметрами больных колоректальным раком. Выявлена взаимосвязь потенциальных факторов риска и повышения в периферической крови количества циркулирующих опухолевых клеток для всех больных колоректальным раком, независимо от способа хирургического вмешательства.

2. Наиболее выраженная ассоциация числа циркулирующих опухолевых клеток в периферической крови до операции у пациентов с метастатическим колоректальным раком по итогам анализа величины коэффициента взаимной сопряжённости (К) сложилась с наличием отдалённых метастазов (статус M1b; К=0,63, р=0,0001) и стадией Т4 (К=0,56, р=0,0009).

3. Полученные результаты подчёркивают важную предикторную значимость уровня циркулирующих опухолевых клеток в периферической крови для оценки потенциала прогрессирования колоректального рака.

Потенциальные конфликты или существующие противоречия в интересах отсутствуют.

Об авторах

Олег Иванович Кит

Ростовский научно-исследовательский онкологический институт

Автор, ответственный за переписку.
Email: katitako@gmail.com
г. Ростов-на-Дону, Россия

Владимир Евгеньевич Колесников

Ростовский научно-исследовательский онкологический институт

Email: katitako@gmail.com
г. Ростов-на-Дону, Россия

Роман Евгеньевич Толмах

Ростовский научно-исследовательский онкологический институт

Email: katitako@gmail.com
г. Ростов-на-Дону, Россия

Инна Арнольдовна Новикова

Ростовский научно-исследовательский онкологический институт

Email: katitako@gmail.com
г. Ростов-на-Дону, Россия

Оксана Геннадьевна Шульгина

Ростовский научно-исследовательский онкологический институт

Email: katitako@gmail.com
г. Ростов-на-Дону, Россия

Екатерина Фёдоровна Комарова

Ростовский научно-исследовательский онкологический институт

Email: katitako@gmail.com
г. Ростов-на-Дону, Россия

Александра Александровна Демидова

Ростовский научно-исследовательский онкологический институт

Email: katitako@gmail.com
г. Ростов-на-Дону, Россия

Список литературы

Дополнительные файлы