Об избирательности действия антибиотика поина на опухолевые клетки

Аннотация

Как известно, основным требованием, предъявляемым к противоопухолевым пре­паратам, является торможение размножения малигнизированных клеток при минималь­ном действии на нормальные клетки организма.

Полный текст

Мы изучали действие антибиотика поина на клетки асцитных перевиваемых опу­холей и нормальные клетки некоторых органов человека и крыс. Были использованы клетки крысиной спонтанно возникшей асцитной формы карциномы молочной железы, крысиной асцитной опухоли яичника и мышиной асцитной карциномы Эрлиха. Для срав­нения использовались только что удаленные полипы носа (от 2 детей), аденоидные разрастания глотки (от 2 детей), гипертрофированные миндалины (от 4 детей), резе­цированные ткани желудка при операции по поводу язвы (от одного человека). От здоровых крыс были использованы: печень (от 5), селезенка (от 4), почки (от 5), легкие (от 2), сердечная мышца (от 3), бедренная мышца (от 2).

Из этих тканей готовились кратковременные культуры в физиологическом раство­ре и сохранялись в рефрижераторе при температуре +4, +6⁰. Предварительно изу­чалось состояние опухолевых клеток в физиологическом растворе. Жизнеспособность асцитных клеток контролировалась по методу Айземана и прививкой их животным. Кроме того, жизнеспособность оценивалась и по состоянию клеточного газообмена методом Варбурга в аппаратах Баркрофта в течение 60 мин. после 24-часового воз­действия раствора кристаллического поина. Содержание поина по ходу опыта опре­делялось биологическим методом на парамециях, позволяющим выявлять несколько микрограммов поина в миллилитре среды [3, 4].

Каждый опыт сопровождался контролем, поставленным в тех же условиях, но без добавления поина [1, 2].

После 3-суточного контрольного пребывания клеток опухолей в жидкостях Ринге­ра с глюкозой и без глюкозы, Тироде с сывороткой и без сыворотки и в физиологи­ческом растворе хлористого натрия (0,85%) в последнем процент мертвых клеток был наименьшим (от 3—4 до 10—11). Поэтому он был избран для кратковременной культуры.

Микроскопическое изучение мазков, приготовленных из клеток, находившихся в физрастворе, показало, что клетки с митозами наблюдались до 72 часов и позже. Ми­тозы находились в малых клетках (дочерние звезды и клубки), в средних и реже в больших (материнские клубки, звезды, а иногда и дочерние звезды, трех-, четырех­полярные).

В опытах учитывалась зависимость между содержанием поина и количеством асцитных клеток и изучалось действие различных концентраций поина на них.

При исходной концентрации поина 2,9 мг/мл содержание его в присутствии асцитных клеток снижалось до 0,025—0,030 мг/мл. При контактировании 1 мл поина (2,9 мг) с 1 мл асцита количество мертвых клеток, начиная с 3 и до 24 часов на­блюдений, составляло 50%. При контактировании того же количества поина с 1 мл асцита, но содержащим вдвое меньшее число клеток по сравнению с вышеприведен­ным вариантом, процент мертвых клеток достигал к трем часам 99,4, а к 24 ча­сам— 100, что подтвердилось и прививкой их животным.

Этот опыт указывает на необходимость учета не только концентрации поина, но и соотношения его количества с биомассой для получения наиболее эффективного действия.

Изучение клеточного газообмена экспериментальных опухолей выявило, что по­сле 3-часового воздействия поина в концентрации 2 мг/мл признаки дыхательного газообмена клеток исчезали, тогда как в контрольном опыте (без поина) поглощение кислорода и выделение углекислого газа сохранялись.

Для исследования реакции на поин немалигнизированных тканей человека и крыс на 0,5 г измельченной ткани брали 4 мл раствора поина в концентрации 1 мг/мл. Содержание поина снижалось во всех опытах до 0,030—0,070 мг/мл к трем часам и сохранялось на таком уровне до 24 часов наблюдений. Изучение газообмена этих клеток показало, что во всех случаях (в контроле и в опыте) имелись все показатели дыхания клеток, говорящие о их жизнедеятельности, как это описывалось в нашей предшествующей работе [4].

Таким образом, в результате проведенных исследований выявлено, что жизнедея­тельность опухолевых клеток под воздействием поина подавляется, тогда как жизне­деятельность немалигнизированных (нормальных) клеток при тех же условиях опы­та сохраняется. Объяснение этого явления, очевидно, нужно искать в том, что малиг­низированные клетки оказываются менее устойчивыми к поину, чем немалигнизированные клетки животных и человека.

Контакт поина с клетками при всех исследованиях сопровождается его значитель­ным расходованием, доходящим до полного исчезновения в среде, содержащей клетки.