Abderhalden's defensive enzymes for experimental nephritis

Abstract

The remarkable discovery of the defensive enzymes of the animal organism by Abderhalden has caused, in a relatively short time, the appearance of a number of works devoted to both the theoretical development of the issue and the study of the purely clinical significance of the reaction in order to recognize the diseases of various organs; moreover, the greatest interest on the part of researchers undoubtedly raised the question of the specificity of these enzymes.

Full Text

Оборонительные ферменты Abderhalden’a при экспериментальныхъ нефритахъ.
Приватъ-доцента М. Н. Чебоксарова.
Замѣчательное открытіе Abderhalden’омъ оборонительныхъ ферментовъ животнаго организма вызвало въ сравнительно короткое время появленіе цѣлаго ряда работъ, посвященныхъ какъ теоретической разработкѣ вопроса, такъ и изученію чисто клиническаго значенія реакціи въ цѣляхъ распознаванія заболѣваній различныхъ органовъ; при чемъ наибольшій интересъ со стороны изслѣдователей несомнѣнно возбуждалъ вопросъ о специфичности этихъ ферментовъ. По отношенію послѣдняго вопроса мнѣнія авторовъ рѣзко раздѣлились: одни—съ Abderhalden’омъ во главѣ настаиваютъ на строгой специфичности оборонительныхъ ферментовъ, другіе признаютъ лишь относительную или групповую специфичность ихъ и, наконецъ, третьи, какъ вапр. Michaelis и Lagerwerck, отказываются признать какую-либо специфичность за этими ферментами и вмѣстѣ съ тѣмъ отрицаютъ совершенно и распознавательное значеніе реакціи Abderhalden’a, значеніе, особенно подчеркиваемое авторами первой категоріи. Но если разрѣшеніе вопроса о специфичности оборонительныхъ ферментовъ представляется дѣломъ будущаго, то самый фактъ существованія и появленія въ крови при извѣстныхъ условіяхъ протеолитическихъ ферментовъ не можетъ возбуждать никакого сомнѣнія. А если эго такъ, то сама собой понятна и та огромная роль, которую должны играть ферменты эти въ патологіи.
Для меня представлялось не лишеннымъ интереса изученіе оборонительныхъ ферментовъ въ крови при экспериментальныхъ токсическихъ нефритахъ и при вызванныхъ путемъ перевязки почечныхъ артерій „асептическихъ некрозахъ" почекъ, слѣдовательно, при тѣхъ именно состояніяхъ, при которыхъ изслѣдователями наблюдалось появленіе въ кровяной сывороткѣ животныхъ нефроли- тическихъ и нефроблаптическихъ веществъ. Извѣстная связь между послѣдняго рода веществами и ферментами Abderhalden’a казалась мнѣ весьма вѣроятной.
Опыты мои были поставлены на собакахъ. У однихъ животныхъ я вызывалъ образованіе нефрита путемъ подкожнаго впрыскиванія имъ 1% раствора хромокислаго кали и ¹/₂% раствора азотно-кислаго урана. Растворъ kali chromici вводился въ количествѣ отъ 5 до 10 сст., а растворъ urani nitrici—въ количествѣ отъ 2-хъ до 5-ти сст. pro dosi; впрыскиваніядѣ лались сначала въ теченіе 2—3 дней ежедневно, а затѣмъ черезъ день. Токсическій нефритъ (бѣлокъ въ мочѣ, клѣтки почечнаго эпителія, клѣточные цилиндры, уменьшенное количество мочи, анурія) развивался обычно послѣ 3—5 инъекцій. У другого ряда собакъ я вызывалъ некротическіе процессы въ почкахъ путемъ перевязки па одной сторонѣ почечныхъ артерій; операція производилась асептически черезъ лапаротомію подъ хлороформеннымъ наркозомъ; всѣ собаки хорошо переносили операцію и выживали. Кровь для изслѣдованія бралась на 7, 10 или 14-ый день послѣ операціи, а у собакъ съ токсическимъ нефритомъ на 3 или 5 день послѣ развитія у животныхъ полной картины нефрита.
Для опредѣленія присутствія оборонительныхъ ферментовъ примѣнялся діализаціонный методъ Abderhalden’a. При постановкѣ реакціи самымъ пунктуальнымъ образомъ соблюдались всѣ указанія автора. Особенно обращалось вниманіе на чистоту сыворотки; если имѣлись хоть малѣйшіе слѣды гемолиза, сыворотка признавалась негодной, ибо я самъ неоднократно могъ убѣдиться, что примѣненіе такой сыворотки можетъ служить источникомъ грубѣйшихъ ошибокъ. Въ качествѣ антигена для реакціи примѣнялись слѣд. органы: 1) нормальная почка (норм, почка) 1) почка, взятая отъ собаки съ хромовымъ нефритомъ (хром, почка), 3) почка отъ собаки, у которой 10 дней тому назадъ была перевязана на соотвѣтствующей сторонѣ почечная артерія (некр. почка), 4) печень, 5) селезенка, 6) надпочечники, 7) сердечная мышца. Количество сыворотки приливаемой въ гильзы во всѣхъ случаяхъ равнялось 1,5 сст. Реактивомъ служилъ ninhydrin. Кровь для изслѣдованія у всѣхъ безъ исключенія собакъ бралась всегда утромъ натощакъ.
Предварительно мной была подвергнута изслѣдованію сыворотка 4 здоровыхъ собакъ, при чемъ въ качествѣ антигена были взяты всѣ вышеуказанные органы; результаты реакціи во всѣхъ 4 случаяхъ получились отрицательные, если не считать сыворотки одной собаки, гдѣ нингидринъ далъ слабое фіолетовое окрашиваніе съ печенью. Убѣдившись на основаніи этихъ предварительныхъ изслѣдованій, что сыворотка нормальныхъ собакъ не содержитъ протеолитическихъ ферментовъ по отношеніи къ почечной ткани, я приступилъ уже къ основнымъ своимъ опытамъ.
Результаты изслѣдованій приведены въ прилагаемой таблицѣ.
Какъ видно изъ таблицы, въ кровяной сывороткѣ трехъ собакъ съ хромовымъ нефритомъ (№№ 7, 8,9), одной съ урановымъ нефритомъ (№ 12) и пяти собакъ съ перевязанными почечными артеріями (№№ 1, 2, 3, 5, 6), т. е. всего въ 9 случаяхъ изъ 12, могло быть обнаружено присутствіе протеолитическихъ ферментовъ по отношенію къ почечной ткани, при чемъ съ большимъ постоянствомъ расщеплялись почки патологическія (9 случаевъ), чѣмъ почки нормальныя (6 случаевъ).
Но помимо расщепленія бѣлковъ почечной ткани въ рядѣ случаевъ констатировано было расщепленіе ткани другихъ органовъ: въ 4 случаяхъ (№№ 4, 6, 7, 9)—печени, въ 2-хъ—сердца (№№ 3,10), въ 4-хъ—селезенки (№№ 3, 7,10, 12) и въ 2-хъ—надпочечниковъ.
Данныя эти показываютъ, что въ кров, сывороткѣ животныхъ съ экспериментально вызванными поврежденіями почекъ появляются, какъ и можно было ожидать, оборонительные ферменты, расщепляющіе почечную ткань, но ферменты эти строго специфическими признать нельзя, ибо одновременно въ значительномъ числѣ случаевъ расщепленію подвергался и бѣлокъ другихъ органовъ, именно, печени, селезенки, сердца и надпочечниковъ. Послѣднее обстоятельство заставляетъ усумниться и въ пригодности реакціи Abderhalden'а для діагностическихъ цѣлей.
Но несмотря на отсутствіе строгой специфичности, наличность при заболѣваніи почекъ въ крови оборонительныхъ ферментовъ, каковыхъ не наблюдалось у нормальныхъ здоровыхъ животныхъ, является во всякомъ случаѣ фактомъ весьма интереснымъ и большой біологической цѣнности. Основная идея Abderhalden’a о появленіи въ крови оборонительныхъ ферментовъ при поступленіи въ нее чуждыхъ организму бѣлковыхъ тѣлъ (въ нашихъ случаяхъ продуктовъ распада почечной ткани) вовсе не подрывается ни отрицаніемъ строгой специфичности этихъ ферментовъ, ни отрицаніемъ діагностическаго значенія реакціи. Біологическое значеніе оборонительныхъ ферментовъ сохраняетъ свою силу.
Что касается появленія въ крови „оборонительныхъ" ферментовъ въ нашихъ случаяхъ экспериментальныхъ заболѣваній почекъ, то можно высказать предположеніе, что здѣсь ходъ всего процесса таковъ: какъ при токсическихъ нефритахъ (хромовыхъ и урановыхъ), такъ и при развившихся подъ вліяніемъ перевязки почечныхъ артерій некрозахъ, происходитъ частичная гибель почечной паренхимы; продукты распада, расплавленія почечной ткани— („нефроблаптины")—проникаютъ въ кровяное русло и какъ вещества чуждыя организму подвергаются дѣйствію протеолитическихъ („оборонительныхъ") ферментовъ, расщепляющихъ сложную бѣлковую молекулу на тѣла простыя, безвредныя для организма. Но протеолитическому дѣйствію ферментовъ можетъ подвергаться и ткань здоровой почки („нефролитическое дѣйствіе"). Возможно, что противъ такого вреднаго для организма нефролитическаго дѣйствія, этотъ послѣдній борется путемъ выработки соотвѣтствующихъ про- тивутѣлъ. Такова, думается мнѣ, взаимная связь между „нефро- блаптинами", „нефролизинами" и „оборонительными" ферментами.
Примѣчаніе при корректурѣ. Настоящая работа была уже закончена весной текущаго года и потому не могли быть учтены и приняты во вниманіе изслѣдованія проф. В. Н. Болдырева о взаимоотношеніи между періодической дѣятельностью кишечника и поступленіемъ въ кровь протеолитическихъ ферментовъ. Изслѣдованія эти опровергаютъ, конечно, какъ специфичность «оборонительныхъ» ферментовъ, такъ и діагностическое значеніе реакціи Abderhalden’a. Но біологическая роль ферментовъ этихъ въ процессѣ расщепленія чуждыхъ организму бѣлковыхъ тѣлъ изслѣдованіями проф. Больдырева не подрывается. Выводы же моей работы, думается мнѣ, не стоятъ въ непримиримомъ противорѣчіи съ данными проф. Болдырева