The effect of removable acrylic dental prostheses on immune homeostasis of the oral mucosa depending on the applied materials and structures

Full Text

Несмотря на значительное продвижение и увеличение роли дентальной имплантации в окклюзионной реабилитации стоматологических пациентов, остаётся актуальным вопрос о влиянии материалов и самой конструкции съёмных протезов на слизистую оболочку десны и её иммунный гомеостаз в области протезного ложа. Потребность в протезировании дефектов зубных рядов съёмными протезами у пациентов после 50 лет достигает 56%, у лиц в возрасте от 40 до 50 лет - 15-20% [6]. В ряде случаев, проводя окклюзионную реабилитацию пациентов с использованием дентальных имплантатов, приходится прибегать к использованию частичных и полных съёмных протезов как на этапах лечения, так и в процессе изготовления условно съёмных протезов при окончательном протезировании данной категории больных. Зачастую воздействие инородного материала приводит к гингивиту, протезному стоматиту, аллергическим реакциям и другим клиническим проявлениям, что в свою очередь ведёт к увеличению периода адаптации, снижению качества жизни, дополнительным временным и финансовым затратам. [5, 8, 9]. Все проводимые ранее исследования по изучению влияния ортопедических конструкций на слизистую оболочку протезного ложа основаны лишь на клинических данных и результатах лабораторных исследований, позволяющих судить об изменениях клеточного состава тканей данной области и иммунном гомеостазе лишь косвенно [1, 2]. Целью нашего исследования стало патогенетическое обоснование эффективности протезирования дефектов зубных рядов и прогнозирование результатов окклюзионной реабилитации пациентов с патологией зубочелюстной системы на основе анализа иммунного гомеостаза в слизистой оболочке полости рта (СОПР). Обследованы 39 человек в возрасте от 25 до 85 лет, из них 12 женщин и 27 мужчин, составивших опытную группу с патологией зубочелюстной системы, которым были изготовлены частичные пластиночные и полные съёмные протезы. Контрольную группу составили 18 человек в возрасте 20-85 лет с патологией зубочелюстной системы, нуждающихся в предварительной хирургической подготовке к протезированию. Проводили клиническое исследование СОПР. Определяли наличие очагов гиперемии, отёчности протезного ложа, оценивали состояние тканей пародонта с использованием пробы Шиллера-Писарева. Статистическая обработка полученных цифровых данных проведена с применением метода статистических критериев и метода корреляционного анализа (по Пирсону). Забор биоптатов производили в одно и то же время (приблизительно в 10 ч утра) с письменного согласия пациентов под инфильтрационной анестезией в области слизистой оболочки протезного ложа. Для исследования брали участки слизистой оболочки десны размером 1×1 мм. Обследование проводили через 3, 6 и 12 мес после сдачи ортопедической конструкции. Обследуемые были разделены на три возрастные группы, согласно классификации Г. Крайга: 20-40 лет, 40-60 лет, старше 60 лет. Идентификацию иммунокомпетентных клеток проводили по одинаковой схеме с учётом локализации цитоспецифичных антигенов (плазматическая мембрана, лизосомы, ядро, комплекс Гольджи). С целью определения фенотипа иммунокомпетентных клеток выполняли иммуногистохимическое исследование по стандартной методике с применением высокочувствительной системы визуализации «En Vision». С помощью моноклональных антител (клон КР1, код №М 0814, лот 119) выявляли макрофаги по маркёру CD68 (высокогликозилированный трансмембранный гликопротеин, который локализуется в лизосомах). Для маркировки CD163 использовали клон 10D6, класс иммуноглобулинов G1. Для выявления тучных клеток применяли моноклональные антитела к CD204, клон SPA-E5, класс иммуноглобулинов G1 (СD204 - фенотип 90% тучных клеток). У 37 из 39 (94,8%) пациентов, начинающих пользоваться зубными протезами, выявлены изменения в тканях пародонта: гиперемия, отёчность и воспалительные явления - у 36 (92,3%) обследуемых, положительная проба Шиллера-Писарева - у 37 (94,8%) пациентов. На основании клинических признаков и объективных показателей у всех диагностированы гингивит и пародонтит лёгкой и средней степени тяжести. Пациенты с проявлениями аллергического протезного стоматита были выделены в отдельную группу и включены в дополнительное исследование. Состояние СОПР и её тканевой гомеостаз зависят от баланса между вновь образующимися и существующими клетками. Детерминирующий фактор в процессе размножения клеток - вступление их в фазу синтеза дезоксирибонуклеиновой кислоты. Один из наиболее чувствительных методов оценки пролиферативной активности - иммуногистохимический анализ экспрессии маркёра Ki-67. Индекс пролиферации (доля Ki-67-позитивных клеток) зависит от возраста и в норме составляет для СОПР 5-7%. На основании результатов иммуногистохимического исследования нами предложена модель динамики иммунного гомеостаза протезного поля при пользовании частичными и полными съёмными протезами у практически здоровых пациентов различного возраста. Полученные данные представлены в табл. 1. В биоптатах, взятых через 3 мес использования протезов, у пациентов опытной группы было отмечено значительное увеличение количества активированных макрофагов (с 1,63 до 2,3 в поле зрения; на 41,2%), тучных клеток (с 1,56 до 2,7; на 75%), клеток Лангерганса (с 1,1 до 3,2 в поле зрения; на 196%). Уменьшалось или оставалось неизменным содержание предшественников дендритных клеток, увеличивалась доля интраэпителиальных лимфоцитов. Эти изменения сопровождались значительным повышением пролиферативной активности эпителия (с 5,4 до 7,9%; на 46,7%). При исследовании биоптатов тех же пациентов через 6 мес использования протезов обнаружено снижение количества активированных макрофагов на 18% во всех возрастных группах, незначительное уменьшение количества Т-лимфоцитов. При этом мы наблюдали дополнительное увеличение количества антиген-презентирующих и тучных клеток на 7 и 2% соответственно. На этом сроке зарегистрировано снижение митотической активности эпителиального пласта с 7,9 до 7,1%. И, наконец, исследование биоптатов, полученных через 12 мес использования протезов, показало дальнейшее снижение количества клеток макрофагального пула на 35%. Зарегистрировано снижение числа клеток Лангерганса при практически неизменном количестве их предшественников, незначительное снижение доли активированных макрофагов. Количество интраэпителиальных лимфоцитов также уменьшалось. Индекс пролиферации в эпителии снижался до 5,83%, хотя превышал аналогичный показатель (5,4%) контрольной группы. Выявлена прямая сильная корреляция между количеством макрофагов и индексом пролиферации (r=0,8), обратная слабая корреляция между возрастом пациентов и индексом пролиферации (r=-0,3), прямая сильная корреляция между количеством клеток Лангерганса, тучных клеток, макрофагов и индексом пролиферации (r=0,7). Выявленные в биоптатах десны области протезного ложа макрофаги, тучные клетки, дендритные клетки, интраэпителиальные лимфоциты обеспечивают иммунный гомеостаз СОПР и достаточно мобильно реагируют на введение ортопедических конструкций в полость рта. Дендритные клетки - гетерогенная популяция антиген-презентирующих клеток костномозгового происхождения. По данным литературы, больше всего дендритных клеток находится в тканях, которые соприкасаются с внешней средой, например органах респираторного, желудочно-кишечного и урогенитального тракта [7, 11]. Наши исследования показали значительное увеличение количества клеток иммунофагоцитарного звена в СОПР зоны протезного ложа при использовании съёмных протезов, в состав которых входят акриловые пластмассы, являющиеся аллергенами [3]. Несмотря на то, что тучные клетки не относят к иммунокомпетентным клеткам, известно, что им принадлежит существенная роль в развитии аллергических реакций. Нарастание количества тучных клеток пропорционально продолжительности пользования съёмными протезами подтверждает наше мнение о необходимости включения препаратов, подавляющих их активность, в протокол ведения пациентов при окклюзионной реабилитации с использованием съёмных протезов [4]. ВЫВОДЫ 1. Использование частичных пластиночных и полных съёмных дентальных протезов ведёт к изменению морфологического субстрата, поддерживающего иммунный гомеостаз СОПР. 2. При использование съёмных протезов прослеживается корреляция индекса пролиферации с содержанием в воспалительном инфильтрате клеток CD68+, CD163+, CD204+, обеспечивающих иммунный гомеостаз СОПР. 3. При использовании съёмных дентальных протезов в течение первых 6 мес в воспалительном инфильтрате десны области протезного ложа увеличивается содержание тучных клеток, дендритных клеток и тканевых макрофагов; в течение последующих 6 мес происходит снижение их количества. 4. Изменение параметров иммунного гомеостаза СОПР при данном виде протезирования можно считать основанием для патогенетического обоснования лечения и прогнозирования результатов окклюзионной реабилитации стоматологических больных. Таблица 1 Среднее количество клеток (в поле зрения), обеспечивающих иммунный гомеостаз, и пролиферативная активность эпителия в биоптатах слизистой оболочки области протезного ложа через 3, 6 и 12 мес пользования съёмными протезами Возрастные группы СD163, активированные макрофаги Предшественники ДК СD68, клетки Лангерганса СD204, предшественники/ТК Интраэпителиальные лимфоциты Ki-67 (индекс пролиферации, %) Через 3 мес От 20 до 40 лет 2,4±0,5** 0,9±0,06* 3,5±0,43 2,8±0,2 2,6±0,15 8,16±0,17 От 40 до 60 лет 2,6±0,07 1,0±0,16** 4,1±0,04 3,1±0,09 3,0±0,04* 8,6±0,2*** Старше 60 лет 1,9±0,3* 0,8±0,01 2,2±0,15** 2,3±0,03 2,1±0,02* 7,18±0,18 Через 6 мес От 20 до 40 лет 2,0±0,5** 1,1±0,06* 3,7±0,43 2,41±0,2 1,9±0,15 7,15±0,17 От 40 до 60 лет 2,1±0,07 1,33±0,16** 4,3±0,04 2,9±0,09 2,2±0,04* 7,59±0,2*** Старше 60 лет 1,75±0,3* 0,8±0,03 2,5±0,15** 2,0±0,03 1,7±0,02* 6,8±0,18 Через 12 мес От 20 до 40 лет 1,9±0,5** 1,1±0,06* 2,9±0,43 2,2±0,2 1,8±0,15 5,9±0,17 От 40 до 60 лет 2,0±0,07 1,2±0,16** 3,5±0,04 2,7±0,09 2,1±0,04* 6,21±0,2*** Старше 60 лет 1,65±0,3* 1,0±0,01 2,1±0,15** 1,3±0,03 1,4±0,02* 5,4±0,18 Примечание: ДК - дендритные клетки; ТК - тучные клетки; статистическая значимость различий по сравнению с первоначальными показателями: *p <0,05; **p <0,001; ***p <0,01.

About the authors

Yu Yu Pervov

Vladivostok State Medical University, Vladivostok, Russia

Email: pervov73@mail.ru

References

Supplementary files