Anxiolytic effect of 2-oxyindolin-3-glyoxylic acid derivatives: computer prediction and experimental confirmation

Full Text

Подавляющее большинство веществ, селективно взаимодействующих с рецепторами биологически активных веществ в центральной нервной системе (ЦНС), являются циклическими азотсодержащими гетеросистемами, к которым относятся производные 2-оксииндолинов. Производные индола проявляют свойства естественных ингибиторов моноаминоксидазы и благодаря структурному сродству способны в ЦНС взаимодействовать с серотониновыми рецепторами, α-адренорецепторами и дофаминовыми рецепторами [7]. Индольные алкалоиды являются агонистами μ-опиоидных рецепторов, антагонистами рецепторов гамма-аминомасляной кислоты типа А (ГАМК-А), селективно связывающих N-метил-D-аспартат (NMDA) рецепторов глутамата, обратными ингибиторами ацетилхолинэстеразы [5]. У эндогенных окисленных индолов установлена противовирусная, противоопухолевая, антибактериальная, противотуберкулёзная, противогрибковая, противосудорожная, анксиолитическая и противовоспалительная активность, а также способность ингибировать активность митохондриальной моноаминоксидазы и гуанилатциклазы в тканях головного мозга [1]. Таким образом, новые синтезированные простые амиды производных 2-оксииндолин-3-глиоксиловой кислоты представляют собой группу, перспективную в плане изучения их фармакологических эффектов и механизмов действия, особенно в отношении ЦНС. Планируя проведение масштабных исследований новых соединений, следует учитывать существенные финансовые затраты, трудоёмкость, этическую строну исследований, а также невозможность одновременного тестирования большого количества соединений на широкий спектр фармакологических эффектов. Для решения возникших проблем предлагают использовать компьютерные программы, цель которых - прогнозирование потенциальной биологической активности вновь синтезированных веществ [3]. Преимущественное большинство существующих на сегодняшний день компьютерных методов молекулярного моделирования и оценки связей «структура-активность» применяют для анализа взаимодействия «лиганд-рецептор» и оптимизации базовых структур на основе анализа количественных соотношений «структура-активность» (quantitative structure-activity relationship) в пределах одного химического класса веществ [6]. Также для оценки потенциальной активности, разделения на структурные группы и отбора новых синтезированных веществ используют методы молекулярного сходства и кластеризации. Цель работы - компьютерное прогнозирование возможного спектра биологической активности простых амидов производных 2-оксииндолин-3-глиоксиловой кислоты и тестирование их анксиолитической активности в эксперименте. Спектр биологической активности и токсичности 20 производных 2-оксоиндолин-3-глиоксиловой кислоты оценивали с помощью компьютерной программы PASS («Prediction of Activity Spectra for Substances», http://www.pharmaexpert.ru/PASSOnline/index.php), разработанной в Институте биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича Российской академии медицинских наук [4]. Программа позволяет оценить вероятность наличия/отсутствия более 4000 фармакотерапевтических эффектов, биохимических и рецепторных механизмов действия, влияния на обмен веществ, регулирования экспрессии генов, активности транспортных систем, побочных эффектов и специфической токсичности. Предсказание основано на знаниях о структуре и активности более 260 000 известных соединений. Полученные результаты прогноза выдаются программой PASS в виде спектра биологической активности. Спектр представлен упорядоченным списком названий соответствующих активностей и вероятностей, при этом показатели Ра («быть активным») и Рi («быть неактивным«) являются функциями значений В-статистики для прогнозируемого вещества. Величины значений варьируют от 0 до 1. Данная программа упорядочивает по убыванию разности Ра-Рi так, что более вероятные виды активности находятся в начале спрогнозированного спектра, при этом средняя точность прогноза превышает 90%. Значение Ра отображает сходство структуры молекулы анализируемого вещества со структурами молекул наиболее типичных «активных» веществ в обучающей выборке [2]. Если, например, величина Ра равна 0,7, то вероятность присутствия данного вида активности у анализируемого вещества составляет 70%. Значение Ра >0,7 с большой вероятностью свидетельствует о том, что анализируемое вещество является аналогом известного лекарственного препарата. Для поиска оригинальных соединений в массиве исследуемых соединений, исходя из рекомендаций разработчиков программы, следует отбирать те, для которых выполняется условие 0,3 <Ра <0,7. При экспериментальном подтверждении прогноза у них высокая вероятность новизны анализируемой структуры. Однако с уменьшением значения Ра снижается вероятность обнаружения необходимого эффекта у изучаемого соединения. Токсичность производных 2-оксииндолин-3-глиоксиловой кислоты рассчитывали с помощью программы GUSAR («General unrestricted structure-activity relationships»). В экспериментальной части работы использовали 140 взрослых крыс обоего пола линии Wistar, группы животных (n=10) были сформированы по полу и возрасту. Крыс содержали в виварии при естественном освещении и стандартном пищевом рационе в пластиковых клетках по три-пять особей в каждой. Все исследования проводили с 17:00 до 20:00 в весенне-осенний период времени. Изучаемые 12 соединений ex tempore суспендировали в воде для инъекций, используя эмульгатор «Твин-80» (1 капля на 25 мг вещества), и вводили животным внутрибрюшинно за 1 ч до начала тестирования в эквитоксических дозах относительно референс-препарата. В качестве препарата сравнения использовали диазепам («Tarchomin S.A.», Польша) в дозе 2 мг/кг массы тела. Контрольной группе вводили в таком же объёме растворитель с эмульгатором. Наличие анксиолитического действия оценивали с помощью экспериментальной установки «конфликтного поведения» (вариант Vogel) [8] собственной конструкции. Камера для животного представляла собой прямоугольный параллелепипед из органического стекла со сторонами 400×300×500 мм, снабжённый электродным полом (металлизированная пластина) и поилкой, которая расположена на стенке камеры на высоте 5 см над электродным полом. Металлизированная пластина и поилка имели специальный блок питания от понижающего трансформатора. Крыса при включении блока, встав на пластину и начав пить, замыкала цепь и получала электроболевой удар током. Установка питалась от сети 220 В. Тест «конфликтного поведения» моделировали столкновением питьевой и оборонительной мотивации. Каждая попытка взятия воды наказывалась электроболевым раздражением. Предварительно крыс подвергли водной депривации на протяжении 72 ч без ограничения потребления сухого корма и вырабатывали навык взятия воды из поилки. При тестировании помещали животное в клетку на 10 мин и вызывали электроболевое раздражение (0,25 мА) при каждом взятии воды из поилки. Регистрировали время латентного периода первого подхода к поилке (в секундах) и количество наказуемых попыток утолить жажду. Статистическую обработку результатов исследования осуществляли с помощью пакета программ «Statistica 6,0» (StatSoft, Inc., США). При анализе полученных результатов было установлено, что простые эфиры производных 2-оксиинодолин-3-глиоксиловой кислоты обладают различными видами биологической активности, однако их спектр часто пересекается. Следует отметить, что лишь единичные виды активности находились в диапазоне Ра≥70%, что свидетельствует о малой вероятности наличия среди изучаемых веществ аналогов известных лекарственных препаратов (табл. 1). В данном случае особый интерес представляли активности, находившиеся в среднем диапазоне шкалы (0,3 <Ра <0,7). По данным прогноза преимущественное большинство производных 2-оксииндолинов обладало способностью лечения острых неврологических заболеваний (Ра=0,339-0,689). У 10 веществ отмечен выраженный агонизм/антагонизм к серотониновым рецепторам разных подтипов (Ра=0,320-0,534). По данным прогноза у амидов 2-оксииндолин-3-глиоксиловой кислоты выявлена способность стимулировать ГАМК-рецепторы (Ра=0,354-0,395), блокировать глутаматные и аспартатные рецепторы (Ра=0,322-0,388, см. табл. 1). При этом 5 веществ способны угнетать ГАМК-аминотрансферазу (Ра=0,324-0,363). Также некоторые соединения могут проявлять анксиолитическую, противосудорожную, антипсихотическую, снотворную, антигипоксическую и ноотропную активность (Ра=0,362-0,643). Для 2-оксииндолинов была спрогнозирована противовоспалительная, жаропонижающая, противовирусная, противотуберкулёзная, антиангинальная и различные виды противоопухолевой активности с вероятностью Ра >0,3. Результаты прогноза программ PASS и GUSAR указывают, что простые амиды 2-оксииндолин-3-глиоксиловой кислоты относятся к нетоксичным и малотоксичным веществам. Они не обладают мутагенным, тератогенным, канцерогенным действием, вероятность проявления нежелательных эффектов выражена минимально. В то же время полученные данные подтверждают многовекторный спектр фармакологических эффектов производных 2-оксииндолина и раскрывают их перспективы потенциального регулирующего действия на ЦНС. На основе результатов компьютерного прогноза было отобрано 12 биологически активных веществ, которые потенциально могли обладать анксиолитической активностью. В специфическом тесте «конфликтного поведения» 3 соединения уменьшали латентный период первого наказуемого взятия воды из поилки (рис. 1). При этом вещество 2-гидрокси-N-нафтален-1-ил-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетамид (IV) уменьшало временной интервал в 1,7 раза по сравнению с показателем в контрольной группе животных (р <0,001). Профилактическое введение 2-гидро-2-(2-оксо-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-N-фенил-ацетамида (VIII) и N-[(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-фенетилкарбамоил-метил]-бензамида (X) также достоверно уменьшало время латентного периода подхода к поилке (р <0,001 и р <0,01 соответственно) (см. рис. 1). При анализе количества наказуемых подходов к поилке установлено, что вещество 2-гидрокси-N-нафтален-1-ил-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетамид (IV) увеличивало их количество в 1,9 раза по сравнению с контролем (р <0,001). Также 2-гидро-2-(2-оксо-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-N-фенил-ацетамид (VIII) повышал количество подходов к поилке в 1,7 раза (р <0,001), а вещество N-[(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-фенетил-карбамоил-метил]-бензамид (X) - в 1,6 раза по сравнению с интактными животными (р <0,002). Следует отметить, что соединение 3-гидрокси-3-(2-окси-циклогексил-метил)-1-пиперидин-1-илметил-1,3-дигидро-индол-2-он (XIII) увеличивало число наказуемых взятий воды, но при этом статистически значимо не влияло на латентный период первого подхода к поилке (см. рис. 1). При моделировании наказуемого поведения, как минимум, 3 производных 2-окси-индолин-3-глиоксиловой кислоты, а именно 2-гидрокси-N-нафтален-1-ил-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетамид (IV), 2-гидро-2-(2-оксо-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-N-фенил-ацетамид (VIII) и N-[(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-фенетилкарбамоил-метил]-бензамид (X) статистически значимо уменьшали латентный период наказуемого взятия воды и количество подходов к поилке. Полученные результаты свидетельствуют о наличии отчётливого анксиолитического действия у этих соединений, которое проявляется уменьшением страха перед болевым раздражением и не уступает референс-препарату диазепаму в дозе 2 мг/кг в тесте «конфликтного поведения». Следует отметить, что для производных 2-оксииндолина характерна нейротропная активность, а именно анксиолитическая, выраженность которой зависит от замещённого радикала (аминокислотного остатка). Полученные результаты обосновывают дальнейшее изучение наиболее активных соединений 2-гидрокси-N-нафтален-1-ил-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетамида (IV), 2-гидро- 2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-N-фенил-ацетамида (VIII) и N-[(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-фенетилкарбамоил-метил]-бензамида (X) для уточнения характера и рецепторных механизмов их анксиолитического действия. ВЫВОД С помощью компьютерных программ PASS и GUSAR среди новых производных 2-оксииндолин-3-глиоксиловой кислоты выявлены низкотоксичные, с малой вероятностью развития побочных эффектов и высокоэффективные по данным теста «конфликтной ситуации» анксиолитические вещества: 2-гидрокси-N-нафтален-1-ил-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетамид, 2-гидро-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-N-фенил-ацетамид и N-[(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-фенетилкарбамоил-метил]-бензамид. При этом 2-гидрокси-N-нафтален-1-ил-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетамид по активности не уступает классическому транквилизатору диазепаму и является перспективным для создания на его основе нового анксиолитика. Таблица 1 Результаты прогноза токсичности и биологической активности простых амидов производных 2-оксииндолин-3-глиоксиловой кислоты № п/п Химические названия веществ LD50, внутрибрюшинно, мг/кг Эквитоксические дозы, мг/кг Наличие (Pa) или отсутствие (Pi) биологической активности, % Прогнозируемая биологическая активность Pa Pi 1 N-(4-бромо-фенил)-4-гидрокси-4-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-бутирамид 1052 7,01 0,404 0,366 0,358 0,356 0,352 0,345 0,332 0,327 0,041 0,047 0,041 0,055 0,014 0,062 0,017 0,016 Противовирусная (гриппозная). Антимикобактериальная. Противотуберкулёзная. Лечение мышечных дистрофий. Ингибитор тиоредоксина. Антидиабетическая. Гипотермическая. Антагонист глутаматных рецепторов 2 N-бифенил-2-ил-2-гидрокси-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетамид 1312 8,75 0,447 0,442 0,359 0,349 0,347 0,338 0,016 0,012 0,034 0,013 0,011 0,012 Лечение острых неврологических растройств. Кардиотоническая. Противоопухолевая (рак лёгких). Противотуберкулёзная. Противовирусная (грипп). Противоопухолевая (солидные опухоли) 3 2-Гидрокси-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-N-фенил-ацетамид 2370 15,8 0,439 0,486 0,389 0,359 0,331 0,33 0,359 0,332 0,321 0,497 0,032 0,086 0,046 0,041 0,09 0,008 0,007 0,09 0,014 0,088 Противовирусная (грипп). Лечение острых неврологических растройств. Лечение мышечных дистрофий. Противотуберкулёзная. Ингибитор ГАМК-аминотрансферазы. Антагонист глутаматных рецепторов. Антагонист 2В-серотониновых рецепторов. Антагонист NMDA-рецепторов. Антагонист 2А-серотониновых рецепторов. Антипсихотическая 4 2-Гидрокси-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-N-фенетил-1- ацетамид 2401 16 0,688 0,653 0,516 0,589 0,465 0,423 0,347 0,332 0,331 0,029 0,01 0,005 0,095 0,024 0,092 0,054 0,047 0,007 Антагонист α2-, β2-никотиновых рецепторов. Активатор потенциал-зависимых кальциевых каналов. Ингибитор алкогольдегидрогеназы [НАД(P)+]. Игибитор тестостерон 17β-дегидрогеназы [НАД(P)+]. Противоневритическая. Антиноцицептивная. Антагонист 7S-серотониновых рецепторов. Антагонист 2L-серотониновых рецепторов. Антагонист NMDA-рецепторов 5 2-Гидрокси-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-N-[1, 2, 4]три-азол-4-ил-ацетамид 932,2 6,21 0,46 0,398 0,36 0,341 0,332 0,338 0,327 0,012 0,011 0,013 0,099 0,014 0,015 0,021 Лечение острых неврологических растройств. Лечение бессонницы. Противотуберкулёзная. Антимикобактериальная. Антагонист AMPA-рецепторов. Антимигренозная. Противоэпилептическая 6 3-(2-Окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-3,4-дигидро-1H-квиноксалин-2-он 1234 8,23 0,689 0,577 0,576 0,459 0,354 0,3 0,03 0,045 0,023 0,078 0,02 0,039 Противоишемическая. Лечение острых неврологических растройств. Противосудорожная. Гипотермическая. Агонист ГАМК-рецепторов. Противоэпилептическая 7 2-Гидрокси-2-(5-метил-2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-N-фенил-ацетамид 1091 7,27 0,479 0,451 0,448 0,384 0,365 0,363 0,322 0,317 0,054 0,106 0,074 0,047 0,039 0,022 0,015 0,067 Противоартритная. Лечение острых неврологических растройств. Ингибитор тиоредоксина. Противовирусная (грипп). Противотуберкулёзная. Ингибитор ГАМК-аминтрансферезы. Антагонист NMDA-рецепторов. Антимикобактериальная 8 N-(2-фтор-фенил)-2-ги-дрокси-2-(2-окси-1,2-ди -гидро-индол-3-илиден)-ацетамид 767,3 5,11 0,436 0,332 0,327 0,015 0,009 0,011 Лечение острых неврологических растройств. Антагонист глутаматных рецепторов. Лечение метаболических заболеваний 9 2-Гидрокси-N-нафтален-1-ил-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетамид 1812 12,1 0,565 0,536 0,49 0,464 0,383 0,377 0,342 0,337 0,02 0,074 0,031 0,098 0,014 0,034 0,014 0,025 Антиастматическая. Антипсихотическая. Антиаллергическая. Анксиолитическая. Антагонист NMDA-рецепторов. Антагонист 2В-серотониновых рецепторов. Агонист 1А-серотониновых рецепторов. Антагонист глутаматных рецепторов 10 3-[2-Гидрокси-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетиламино]-пропионовой кислоты 1634 10,9 0,46 0,388 0,361 0,345 0,309 0,3 0,046 0,388 0,064 0,084 0,023 0,008 Нарушение остроты зрения. Субстрат CYP2C19. Субстрат CYP1A2. Индуктор CYP2C19. Ингибитор РНК-зависимой РНК-полимеразы. Ингибитор дигидрооротазы 11 N-(4-бром-фенил)-2-гидрокси-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетамид 2016 13,4 0,522 0,438 0,426 0,419 0,407 0,397 0,384 0,367 0,019 0,009 0,029 0,023 0,076 0,038 0,008 0,166 Противовирусная (грипп). Ингибитор дигидрооротазы. Лечение мышечной дистрофии. Противотуберкулёзная. Противоартритная. Антимикобактериальная. Антагонист глутаматных рецепторов. Лечение острых неврологических растройств 12 2-Гидрокси-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетамид 1461 9,74 0,591 0,566 0,491 0,396 0,359 0,35 0,345 0,052 0,049 0,023 0,009 0,023 0,066 0,039 Антипсихотическая. Лечение острых неврологических растройств. Противовирусная (грипп). Лечение заболеваний поджелудочной железы. Ингибитор тирозин-3-гидроксилазы. Ингибитор ГАМК-аминтрансферезы. Противотуберкулёзная 13 3-Гидрокси-3-(2-окси-циклогексил-метил)-1-пипери-дин-1-илметил-1,3-дигидро-индол-2-он 1129,3 7,53 0,556 0,517 0,511 0,426 0,405 0,395 0,384 0,342 0,338 0,321 0,025 0,009 0,068 0,16 0,114 0,114 0,168 0,043 0,023 0,113 Противосудорожная. Для лечения рассеянного склероза. Противоопухолевая. Антагонист 1А-серотониновых рецепторов. Ноотропная. Агонист ГАМК-рецепторов. Антагонист NMDA-рецепторов. Противотуберкулёзная. Снотворная. Анксиолитическая 14 2-Гидрокси-N-(4-метил-2-окси-2H-хромен-7-ил)-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетамид 728,9 4,86 0,498 0,434 0,442 0,428 0,415 0,422 0,385 0,377 0,366 0,35 0,019 0,01 0,032 0,01 0,03 0,049 0,027 0,079 0,117 0,123 Индуктор CYP2E1. Индуктор CYP1A2. Субстрат CYP1A2. Ингибитор дигидрооротазы. Ингибитор липопероксидазы. Субстрат CYP2A6. Противоартритная. Субстрат CYP2C8. Противоопухолевая. Противовоспалительная 15 2-Гидрокси-N-[2-(нафтален-1-иламино)-етил]-2-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетамид 955,9 6,37 0,608 0,411 0,367 0,349 0,323 0,324 0,036 0,042 0,017 0,08 0,061 0,071 Лечение острых неврологических растройств. Ингибитор РНК-зависимой РНК-полимеразы. Ингибитор дигидрооротазы. Индуктор CYP2C19. Противоопухолевая (множественная миелома). Противовирусная (грипп) 16 (Е)-2-гидрокси-N-(4-гидроксинаф-тален-1-ил)-2-(2-оксииндолин-3-илиден)-ацетамид 1630 10,9 0,54 0,434 0,427 0,316 0,327 0,316 0,329 0,059 0,033 0,094 0,068 0,077 0,068 0,071 Лечение острых неврологических растройств. Противовирусная (грипп). Противоопухолевая. Антимикобактериальная. Лечение мышечной дистрофии. Антимикобактериальная. Противоишемическая 17 (Е)-2-гидрокси-N-(5-гидроксинаф-тален-1-ил)-2-(2-оксииндолин-3-илиден)-ацетамид 1630 10,9 0,54 0,434 0,427 0,399 0,383 0,327 0,326 0,324 0,316 0,059 0,03 0,094 0,028 0,015 0,077 0,071 0,016 0,068 Лечение острых неврологических растройств. Противовирусная (грипп). Противоопухолевая. Противотуберкулёзная. Ингибитор дигидрооротазы. Лечение мышечной дистрофии. Противоишемическая. Ингибитор ГАМК-аминтрансферезы. Антимикобактериальная 18 Гидрокси-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-ацетамид 704,5 4,7 0,552 0,54 0,531 0,517 0,434 0,369 0,35 0,341 0,041 0,059 0,044 0,024 0,033 0,004 0,059 0,027 Гипотермическая. Лечение острых неврологических растройств. Ингибитор тиоредоксина. Спермицидная. Противовирусная (грипп). Стимуляция экспрессии ABCA1. Противоопухолевая (солидные опухоли). Ингибитор ГАМК-аминтрансферезы 19 N-[(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-фенетил-карбамоил-метил]-бензамид 703,8 4,69 0,441 0,412 0,377 0,321 0,32 0,032 0,06 0,022 0,013 0,011 Лечение острых неврологических растройств. Противоопухолевая (остеосаркома). Антагонист NMDA-рецепторов. Антагонист 1В-серотониновых рецепторов. Антагонист 2В-серотониновых рецепторов 20 N-[(нафтален-1-илкарбамоил)-(2-окси-1,2-дигидро-индол-3-илиден)-метил]-бензамид 1599 10,7 0,453 0,441 0,423 0,318 0,331 0,388 0,387 0,011 0,026 0,013 0,057 0,066 0,021 0,014 Лечение острых неврологических растройств. Лечение мышечной дистрофии. Противоишемическая. Противотуберкулёзная. Противоопухолевая (остеосаркома). Антагонист NMDA-рецепторов. Антагонист глутаматных рецепторов Примечание: LD50 - полулетальная доза; ГАМК - гамма-аминомасляная кислота; NMDA-рецептор - рецептор глутамата, селективно связывающий N-метил-D-аспартат; НАД - никотинамидадениндинуклеотид; АМПА-рецептор - рецептор α-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолпропионовой кислоты; CYP - цитохром Р; РНК - рибонуклеиновая кислота. Рис. 1. Влияние производных 2-оксииндолин-3-глиоксиловой кислоты на поведение животных в тесте «конфликтной ситуации» (вариант Vogel). A - латентный период первого наказуемого взятия воды из поилки; Б - количество наказуемых попыток утолить жажду; *p <0,05 по сравнению с контрольной группой животных; I - интактные животные (контрольная группа); II - диазепам, 2 мг/кг; III - 14; IV - 9; V - 4; VI - 6; VII - 15; VIII - 3; IX - 18; X - 19; XI - 7; XII - 12; XIII - 13; XIV - 5 (III-XIV - опытные группы, порядковый номер вещества - см. в табл. 1). Луценко - Рисунок 1А.tif I II III IV V VI VII VIII IX X XI XII XIII XIV А Луценко - Рисунок 1 Б.tif I II III IV V VI VII VIII IX X XI XII XIII XIV

About the authors

R V Lutsenko

Ukranian Medical Stomatological Academy, Poltava, Ukraine

Email: farmalu@mail.ru

V N Bobyrev

Ukranian Medical Stomatological Academy, Poltava, Ukraine

T A Devyatkina

Ukranian Medical Stomatological Academy, Poltava, Ukraine

References

Supplementary files