Особенности окислительного стресса у больных алкогольным делирием, инфицированных вирусами гепатита C и иммунодефицита человека

Полный текст

Алкоголизм широко распространён среди па-перекисным окислением липидов и карбонилироциентов, инфицированных вирусом гепатита С ванием белков у больных алкогольным делирием, (ВГС) и вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) инфицированных и коинфицированных ВГС и [1, 5, 7], причём хроническое употребление этанола ВИЧ. усиливает репликацию и того, и другого вируса [8]. Клинико-лабораторное обследование было выОкислительный стресс способствует прогрессирова-полнено на 110 мужчинах трудоспособного возраснию алкоголизма, а также ВГС и ВИЧ-инфекции та (23-55 лет) с диагнозом «алкогольный делирий», [5]. В случаях ВГС и ВИЧ-инфекции окислитель-из них 28 пациентов - с диагнозом «алкогольный ный стресс непосредственно связан с экспрессией делирий» и ВГС (группа «АД + ВГС»), 18 ВИЧнекоторых вирусных белков. Их экспрессия может инфицированных (группа «АД + ВИЧ»), 44 - с осуществляться на фоне длительного окислитель-алкогольным делирием без коморбидных вирусного стресса, обусловленного прямым токсическим ных инфекций (группа «АД»), 20 - коинфициродействием этанола и продуктов его метаболизма в ванных ВГС и ВИЧ (группа «АД + ВГС + ВИЧ»). организме, таких как уксусный альдегид [5]. Не Критерием включения было наличие алкоголизма исключено регуляторное действие вирусных бел-II-III стадии. Критерии исключения: хронические ков на различные звенья клеточного метаболизма, заболевания (туберкулёз, сахарный диабет). В кавключая свободнорадикальное окисление, что мо-честве группы сравнения использовали пациентов, жет отразиться на выраженности окислительного не страдающих алкоголизмом и наркоманией, стресса у инфицированных ВГС и ВИЧ, больных инфицированных ВГС (группа «ВГС», 12 челоалкоголизмом. В свете этого мы посчитали целе-век) и 10 ВИЧ-инфицированных больных (группа сообразным исследование соотношения между «ВИЧ»). В качестве контроля были исследованы Таблица 1 Содержание молекулярных продуктов перекисного окисления липидов и карбонилированных белков у больных алкогольным делирием с коморбидной инфекцией вирусом гепатита С (ВГС) и вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) Показатели Базальные КД и СТ, у.е.о. Индуцированные КД и СТ, у.е.о. Карбонилированные белки, мкМ/г белка 1. Контроль (n=22) 0,349±0,027 192,5±4,7 38,23±3,14 2. Алкогольный делирий (n=42) 0,21±0,048* 174,6±2,4* 198,4±10,2* 3. ВГС (n=12) 0,16±0,024* 169,4±5,29* 270,6±15,14* 4. ВИЧ (n=10) 0,23±0,019* 173,7±4,49* 309,46±20,5* 5. Алкогольный делирий + ВГС (n=28) 0,11±0,007*# 161,8±5,39* 106,23±10,8*# 6. Алкогольный делирий + ВИЧ (n=18) 0,104±0,007*# 170,36±7,4* 109,28±9,7*# 7. Алкогольный делирий + ВИЧ + ВГС (n=20) 0,28±0,021*#^ 169,8±4,32* 293,42±6,27*#^ Примечание. В таблице содержание гептан-растворимых кетодиенов (КД) и сопряжённых триенов (СТ) на базальном уровне представлено в виде условных единиц окисления (у.е.о.), в виде отношений экстинкции при Е278 нм к Е220 нм (Е278/220). Этим же индексом выражалось содержание изо-пропанол-растворимых кетодиенов и сопряжённых триенов после индукции в системе Fe2+/аскорбат. *Значимость различий с 1-й группой; #значимость различий со 2-й группой; ^значимость различий с группами 3 и 4. мужчины (22 человека в возрасте 24-52 лет), не страдающие алкоголизмом и не инфицированные ВГС и ВИЧ. К ним применяли те же критерии исключения, как и к больным с алкогольным делирием. Забор крови для лабораторных исследований осуществляли путём пункции кубитальной вены. В плазме крови по методике Е.Е. Дубининой и соавт. [3] определяли уровень спонтанного и металл-катализируемого окисления белков. Метод оценки окислительной модификации белков основан на реакции взаимодействия окисленных аминокислотных остатков с 2,4-динитрофенилгидразином с образованием 2,4-динитрофенилгидразонов. Содержание молекулярных продуктов перекисного окисления липидов определяли по И.А. Волчегорскому и соавт [2]. По методике Е.И. Львовской и соавт. определяли уровень Fe2+/ аскорбат-индуцированного перекисного окисления липидов (ПОЛ) [4]. Результаты обрабатывали общепринятыми методами вариационной статистики и выражали в виде средней арифметической (М) и её стандартной ошибки (m). Статистически значимые различия между несколькими группами определяли с помощью критерия Краскелла-Уоллиса. Для определения статистически значимых различий между двумя сравниваемыми группами использовали критерий Манна-Уитни (U). Различия считали значимыми при р ≤0,05. Статистические взаимосвязи изучали при помощи непараметрического корреляционного анализа, выполняя расчёт коэффициентов корреляции рангов по Спирмену (Rs). В ходе исследования было установлено, что во всех группах наблюдались признаки цитолитического синдрома в виде повышенной активности аминотрансфераз и окислительного стресса, проявляющегося в повышении содержания карбонилированнных белков относительно контроля (табл. 1). Однако исследованные группы варьировали по выраженности как цитолитического синдрома, так и окислительного стресса. Наиболее отчётливое увеличение активности аминотрансфераз и повышение уровня карбонилированных белков характерно для групп «ВГС» и «ВИЧ». В этих группах также снижалось содержание молекулярных продуктов ПОЛ на базальном уровне при одновременном увеличении содержания Fe2+/аскорбат-индуцированного ПОЛ. В группах «АД», «АД + ВГС» и «АД + ВИЧ» также отмечено усиление окислительного стресса при одновременном повышении уровня аминотрансфераз и показателя тимоловой пробы (табл. 2). При этом в группе «АД» зарегистрировано увеличение как базального, так и металл-индуцируемого карбонилирования белков по сравнению с контролем. Также по сравнению с контролем отмечено снижение содержания молекулярных продуктов ПОЛ на фоне повышенного содержания Fe2+/аскорбатиндуцированного ПОЛ. Аналогичное соотношение между карбонилированием белков и ПОЛ наблюдается у больных группы «АД + ВГС». Таким образом, в группах «АД + ВГС» и «ВГС» выявлено усиление карбонилирования белков при одновременном снижении уровня ПОЛ. Однако выраженность этих изменений широко варьирует в исследованных группах. Так, у пациентов с «АД + ВГС» наблюдался более низкий уровень карбонилированных белков и молекулярных продуктов ПОЛ по сравнению с группой «ВГС». Помимо этого, в группе «АД + ВГС» по сравнению с группой «ВГС» отмечены более низкие значения показателя тимоловой пробы, а также активности аминотрансфераз крови. Установлены противоположные тенденции при сопоставлении инфицированных и неинфицированных больных алкогольным делирием. Так, в группе «АД + ВГС» по сравнению с группой «АД» отмечены более высокие значения тимоловой пробы и активности аминотрансфераз на фоне более выраженного окислительного стресса, проявляющегося в более высоком уровне карбонилированных белков и молекулярных продуктов ПОЛ. Наиболее высокий уровень окислительного стресса зарегистрирован у больных алкоголизмом, одновременно инфицированных ВГС и ВИЧ. У них по сравнению с Таблица 2 Активность аминотрансфераз и показатель тимоловой пробы у больных алкогольным делирием с коморбидным инфицированием вирусом гепатита С (ВГС) и вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) Показатели АСТ, ЕД/л АЛТ, ЕД/л Тимоловая проба, ЕД/л 1. Контроль(n=22) 34,9±5,27 29,25±4,7 2,3±0,14 2. Алкогольный делирий (n=42) 179,14±9,32 104,23±11,45 5,31 ±0,72* 3. ВГС (n=12) 151,24±7,28 145,32±6,29 10,98±1,14* 4. ВИЧ (n=10) 190,23±10,78 173,7±4,49* 11,46±0,95* 5. Алкогольный делирий + ВГС (n=28) 242,21±12,48* 174,6±9,4* 6,45±0,76 6. Алкогольный делирий + ВИЧ (n=18) 199,25±11,74*# 123,36±9,4* 6,98±0,83 7. Алкогольный делирий + ВИЧ + ВГС (n=20) 544,12 ±60,021*#;^ 169,8±4,32* 12,42±1,27*#^ Примечание. Приведены условные единицы активности аспартатаминотрансферазы (АСТ) и аланинаминотрансферазы (АЛТ) и условные единицы показателя тимоловой пробы; *значимость различий с 1-й группой; #значимость различий со 2-й группой; ^значимость различий с группами 3 и 4. группой «АД + ВГС» повышен уровень карбонилированных белков и гептан-растворимых диеновых конъюгатов, а также резко увеличены значения тимоловой пробы и активности аминотрансфераз. При сопоставлении группы «АД + ВГС + ВИЧ» с группой «ВГС» не были обнаружены статистически значимые различия по показателям тимоловой пробы и активности аминотрансфераз. Однако в группе «АД + ВГС + ВИЧ» по сравнению с группой «ВГС» отмечено более высокое содержание металлиндуцированных карбонилированных белков и молекулярных продуктов ПОЛ. Аналогичные тенденции наблюдаются при сопоставлении между группами «АД + ВГС + ВИЧ» и группой «ВИЧ». Полученные результаты свидетельствуют о том, что в условиях алкогольного делирия, а также при инфицировании больных алкоголизмом ВГС и ВИЧ, как и у людей, не страдающих алкоголизмом, но инфицированных этими вирусами, окислительный стресс проявляется исключительно в усилении карбонилирования белков. Снижение уровня ПОЛ во всех рассматриваемых случаях может быть связано с дефицитом ненасыщенных жирных кислот, служащих основными субстратами для переокисления. В пользу этого свидетельствует факт снижения уровня Fe2+/аскорбат-индуцированного ПОЛ, характеризующего окисляемость липидов. При исследуемых заболеваниях усиление окислительного стресса ассоциируется с дисфункцией печени, проявляющейся в увеличении показателей тимоловой пробы. Рост аминотрансферазной активности может отражать цитолиз гепатоцитов. Известно, что при алкогольном делирии, так же как и при рассматриваемых вирусных инфекциях, развивается гепатит [1]. У пациентов, инфицированных ВИЧ и ВГС, отмечены более высокие значения тимоловой пробы, чем у неинфицированных больных алкоголизмом. Однако активность аминотрансфераз в группах «АД» «ВГС» и «ВИЧ» сопоставима. Таким образом, при вирусной инфекции по сравнению с алкоголизмом более отчётливо выражено воспалительное поражение печени, несмотря на одинаковую выраженность цитолитического синдрома. В связи с этим уместно обратить внимание на тот факт, что именно для данных вирусных инфекций характерен наиболее высокий уровень карбонилирования белков. Между тем в группах «ВГС» и «ВИЧ» отмечены положительные корреляции между содержанием карбонилированных белков и показателем тимоловой пробы. Особенно важно, что в группах «АД + ВГС» и «АД + ВИЧ» содержание карбонилированных белков было ниже, чем в группах инфицированных, не страдающих алкоголизмом, и выше, чем у неинфицированных больных алкоголизмом. Аналогичные соотношения получены по показателям тимоловой пробы. Скорее всего, это связано с ролью карбонилирования белков в прогрессировании вирусной инфекции. Вероятно, при ВГС и ВИЧ-инфекции определённая группа вирусных белков вызывает окислительный стресс в органах и тканях, который регистрируется в виде повышенного уровня карбонилированных белков в группах «ВГС» и «ВИЧ». В случае групп «АД + ВГС» и «АД + ВИЧ» экспрессия вирусных белков осуществляется на фоне алкоголь-индуцированного окислительного стресса. При этом могут карбонилироваться и вирусные белки, что ограничивает прогрессирование вирусного гепатита. Однако совместное инфицирование ВГС и ВИЧ у больных алкоголизмом приводит к «резонансу» вирус-зависимого и алкоголь-зависимого воспалительного поражения печени, что проявляется в более выраженном по сравнению с группами «АД + ВГС» и «АД + ВИЧ» приросте активности аспартатаминотрансферазы, увеличении показателя тимоловой пробы и содержания карбонилированных белков. ВЫВОДЫ У больных алкогольным делирием, инфицированных вирусами гепатита С и иммунодефицита человека, окислительный стресс в виде повышения содержания карбонилированных белков более выражен по сравнению с неинфицированными больными алкоголизмом. У инфицированных и неинфицированных больных алкогольным делирием снижение уровня перекисного окисления липидов на базальном уровне ассоциируется со снижением уровня Fe2+/ аскорбат-индуцированного перекисного окисления липидов. Исследование выполнено при поддержке Министерства образования и науки Российской Федерации, соглашение 14.B37.21.0578 от 10.08.2012.

Об авторах

Вадим Эдуардович Цейликман

Южно-Уральский государственный медицинский университет, г. Челябинск

Email: vadimed@yandex.ru

Константин Александрович Бабин

Челябинская областная клиническая наркологическая больница

Дмитрий Борисович Виноградов

Челябинская областная клиническая наркологическая больница

Юлия Михайловна Шатрова

Южно-Уральский государственный медицинский университет, г. Челябинск

Борис Васильевич Изаровский

Челябинская областная клиническая наркологическая больница

Евгения Борисовна Манухина

Центр медицинских наук Университета Северного Техаса (Форт Уэрт)

Гарри Фред Дауни

Центр медицинских наук Университета Северного Техаса (Форт Уэрт)

Ольга Борисовна Цейликман

Южно-Уральский государственный университет», г. Челябинск

Андрей Ханифович Мингазов

Южно-Уральский государственный медицинский университет

Список литературы

Дополнительные файлы