Влияние сульфата железа на эндокринную дисфункцию жировой ткани крыс линии Wistar

Полный текст

В последние десятилетия в значительной степени изменился взгляд на функции жировой ткани (ЖТ). В связи с открытием секреторной функции адипоцитов механистический взгляд на развитие ожирения был пересмотрен. В настоящее время ожирение рассматривают как хроническое вялотекущее воспаление в ЖТ, сопровождающееся эндокринной дисфункцией адипоцитов [3]. Классический взгляд на этиологию ожирения также подвергся значительным изменениям. Так, были получены данные, указывающие на влияние значительного количества химических соединений на эндокринную функцию ЖТ [1]. К подобным так называемым эндокринным дизрапторам (от англ. disrupt - разрушать) относится значительное количество органических соединений [6]. В то же время роль неорганических веществ изучена в значительно меньшей степени. Учитывая широкое распространение в окружающей среде соединений железа, а также наличие данных, указывающих на связь между нарушением гомеостаза железа в организме и развитием ожирения, целью настоящего исследования стало изучение влияния поступления сульфата железа с питьевой водой на состояние эндокринной функции ЖТ и выраженность адипогенного эффекта высокожировой диеты у крыс линии Wistar в хроническом эксперименте. Исследование проведено на 24 крысах-самках линии Wistar в соответствии с «Правилами проведения работ и использования экспериментальных животных». На момент начала эксперимента отбирали животных в возрасте 2 мес с одинаковой массой тела. Проведение работы было одобрено Локальным этическим комитетом. Животных содержали в лаборатории в условиях искусственного освещения (12-часовой световой день) и кормления ad libitum. В течение недели до начала эксперимента животные находились на карантине в условиях лаборатории. В качестве стандартной диеты использовали комбикорм (ЗАО «Оренбургский комбикормовый завод»). В качестве диеты с высоким содержанием жира применяли стандартную диету с увеличивающейся долей жиров (1-й месяц - 21,7%, 2-й - 31,6%, 3-й - 40,1% жиров по отношению к общей энергетической ценности рациона). Все животные были разделены на группы по 6 животных в каждой. Животные первой и второй групп служили контрольными и содержались соответственно на стандартной и высокожировой диете. Животные третьей и четвёртой групп получали с питьевой водой сульфат железа (FeSO4 ·7H2O) в концентрации 3 мг/л на фоне стандартной и высокожировой диеты соответственно. Общая длительность эксперимента составила 3 мес (90 сут). По окончании эксперимента оценивали морфометрические показатели животных, включающие измерение массы тела, окружности грудной клетки, окружности живота, соотношения окружность живота / окружность грудной клетки, индекса массы тела на основании результатов измерения длины и массы тела [6]. Вскрытие производили путём срединной лапаротомии. Для исследования использовали околоматочную ЖТ (параметрий). Выделенный параметрий взвешивали на аналитических весах, на основании данных о массе данного депо ЖТ рассчитывали индекс ожирения: масса ЖТ / масса тела × 100%. После взвешивания образцы ЖТ забирали для последующего анализа. Определение концентрации фактора некроза опухоли альфа и интерлейкина-6 в сыворотке крови крыс проводили методом иммуноферментного анализа с использованием наборов «eBioscience», адипонектина и моноцитарного хемотаксического белка 1 с использованием стандартных наборов фирмы «USCN» («Life Science Inc»), инсулина и лептина с применением наборов «AccuBind» и «Biovendor» соответственно. Определение концентрации глюкозы в сыворотке крови проводили с использованием набора реагентов «Roche» на автоматическом биохимическом анализаторе «Cobas Integra 400 plus». В качестве критерия содержания железа в биологических средах организма использовали шерсть животных, собранную с каудальной части спины. Определение содержания железа в шерсти и образцах ЖТ производили методом атомной эмиссионной спектрометрии на спектрометре «Optima 2000 DV». Статистический анализ данных осуществляли с помощью программного пакета Statistica 10 for Windows. Данные представлены в виде среднего значения с указанием среднеквадратического отклонения (M±σ). Погрупповое сравнение значений производили с помощью модуля ANOVA. Выявление достоверных различий между группами осуществляли методом апостериорного сравнения с использованием критерия наименьшей значимости (Fisher LSD-test). В ходе исследования было установлено, что морфометрические показатели лабораторных животных, получающих с питьевой водой сульфат железа, характеризовались более выраженным изменением по сравнению с соответствующими контрольными группами. При этом наиболее значительные изменения отмечены в группе животных, получающих сульфат железа с питьевой водой на фоне высокожировой диеты. Как абсолютное, так и относительное содержание ЖТ в четвёртой группе животных превышало данные показатели у контрольных животных, содержащихся на высокожировой диете (вторая группа) на 33 и 25% соответственно. ный показатель у животных, содержащихся на высокожировой диете (вторая группа), на 45%. Необходимо отметить, что употребление солей железа на фоне используемых диет приводило к увеличению концентрации адипонектина в сыворотке крови животных, которое, тем не менее, не было статистически значимым. На фоне введения 3 мг/л FeSO4 ·7H2O с питьевой водой у животных также присутствовала тенденция к увеличению концентрации циркулирующего фактора некроза опухоли альфа, достигая наибольших значений в четвёртой группе. При Таблица 1 Влияние сульфата железа и диеты на морфометрические показатели лабораторных животных Группа Масса тела, г ОГК, см ОЖ, см ОЖ/ОГК ИМТ ЖТ, г ИО, % СтД 296,00±25,26 15,58±0,49 17,58±0,49 1,13±0,04 0,68±0,04 7,58±2,64 2,57±0,83 ВЖД 307,00±18,14 16,10±0,89 18,80±0,84 1,17±0,03 0,76±0,09 11,84±2,43А 3,87±0,83A,C Fe+СтД 304,80±5,97 16,20±0,45 18,50±1,00 1,14±0,04 0,69±0,05 8,48±2,02 2,78±0,63 Fe+ВЖД 324,60±31,60А 15,90±0,22 19,40±1,39A,C 1,22±0,08 0,76±0,10А 15,74±3,80A,B,C 4,82±0,94A,B,C Примечание: A - по сравнению с группой животных, получавшей стандартную диету (СтД), p <0,05; B - по сравнению с группой, получавшей высокожировую диету (ВЖД), p <0,05; C - по сравнению с группой животных, получающих стандартную диету и 3 мг/л сульфата железа с питьевой водой (Fe+СтД), p <0,05; ОГК - окружность грудной клетки, ОЖ - окружность живота; ИМТ - индекс массы тела; ЖТ - масса жировой ткани, ИО - индекс ожирения. Содержание железа в организме животных, оцениваемое по концентрации железа в шерсти, в группах, получающих 3 мг/л сульфат железа (третья и четвёртая группы), достоверно превышало соответствующие контрольные значения (первая и вторая группы) на 31 и 37% (табл. 2). В то же время изменение содержания железа в ЖТ не коррелировало с таковым в шерсти. Так, достоверно наибольшее содержание железа в образцах ЖТ отмечено лишь в четвёртой группе животных (Fe + высокожировая диета), превышая соответствующий контроль (высокожировая диета) на 50%. Как видно из данных, представленных в табл. 3, употребление сульфата железа на фоне стандартной и высокожировой диет приводило к изменению концентрации циркулирующих адипокинов в сыворотке крови лабораторных животных. Так, наибольшая концентрация лептина, служащего одним из ключевых маркёров ожирения, отмечена у крыс четвёртой группы (Fe + высокожировая диета); она превышала дан Таблица 2 Влияние сульфата железа и диеты на содержание железа в шерсти и жировой ткани крыс Диета Содержание в шерсти, мкг/г Содержание в жировой ткани, мкг/г СтД 20,04±0,69 6,35±1,18 ВЖД 20,24±3,05 5,27±1,52 Fe+СтД 26,18±6,16A,B 6,99±0,81 Fe+ВЖД 27,64±2,63A,B 7,85±0,69A,B Примечание: A - по сравнению с группой, получавшей стандартную диету (СтД), p <0,05; B - по сравнению с группой, получавшей высокожировую диету (ВЖД), p <0,05; Fe - диета, дополненная 3 мг/л сульфата железа с питьевой водой. этом, несмотря на то, что введение солей железа на фоне высокожировой диеты не приводило к увеличению концентрации моноцитарного хемотаксического белка 1 по сравнению с контрольными животными, содержащимися на высокожировой диете, употребление питьевой воды, содержащей 3 мг/л FeSO4 ·7H2O, на фоне стандартной диеты приводило к 74% увеличению содержания данного цитокина по сравнению с контрольной группой, содержащейся на стандартной диете. Концентрация интерлейкина-6 в сыворотке крови экспериментальных животных, получающих сульфат железа, практически не отличалась от соответствующих контрольных значений. Как видно из данных, представленных в табл. 4, соли железа, высокожировая диета и их сочетание не приводили к достоверному изменению концентрации инсулина и глюкозы в сыворотке крови экспериментальных животных. В то же время в группе животных, получающих сульфат железа на фоне высокожировой диеты, произошло увеличение концентрации инсулина на 25%. Таким образом, в ходе исследования установлено, что употребление питьевой воды, содержащей сульфаты железа, приводит к потенцированию адипогенного эффекта высокожировой высококалорийной диеты, о чём свидетельствует более выраженное изменение основных морфометрических показателей животных по сравнению с соответствующими контрольными группами. Наблюдаемое увеличение содержания железа в образцах шерсти экспериментальных животных свидетельствует о кумуляции данного металла в организме, являясь критерием эффективности поступления Таблица 3 Влияние солей железа и диеты на концентрацию адипокинов в сыворотке крови Диета Адипонектин, нг/мл Лептин, пг/мл MCP-1, нг/мл ФНОα, пг/мл ИЛ-6, пг/мл СтД 189,86±64,03 126,67±8,02 1,38±0,16 0,02±0,00 28,80±7,67 ВЖД 127,15±5,99A,C 372,60±124,65A 3,37±1,36A 0,03±0,00 51,54±5,29A,C Fe+СтД 350,35±20,58A 180,43±31,16 2,40±0,50A 0,03±0,01 23,56±1,47 Примечание: A - по сравнению с группой животных, получавших стандартную диету (СтД), p <0,05; B - по сравнению с группой, получавшей высокожировую диету (ВЖД), p <0,05; C - по сравнению с группой животных, получающих стандартную диету и 3 мг/л FeSO4·7H2O с питьевой водой (Fe+СтД), p <0,05; MCP-1 - моноцитарный хемотаксический белок 1, ФНОα - фактор некроза опухоли альфа, ИЛ-6 - интерлейкин-6; Fe - диета, дополненная 3 мг/л FeSO4·7H2O с питьевой водой. железа в организм. Более того, статистически значимые изменения в содержании железа в ЖТ свидетельствуют о значительной его роли в функционировании ЖТ при адипогенезе. Данный факт может быть обусловлен секвестрацией железа в резидентных макрофагах ЖТ при ожирении, сопровождающемся вялотекущим воспалительным процессом [8]. Более того, непосредственное увеличение количества макрофагов, привлекаемых в ЖТ вследствие воспаления ЖТ, также может приводить к увеличению локального уровня железа [7]. Наличие воспаления в ЖТ, так или иначе опосредованного системным или локальным действием железа, подтверждается также повышением концентрации провоспалительных цитокинов в сыворотке животных, получающих с питьевой водой соли железа. Более выраженное снижение количества адипонектина и повышение концентрации лептина также свидетельствуют о развитии эндокринной дисфункции ЖТ [4] у крыс, получающих с питьевой водой сульфаты железа. Несмотря на отсутствие достоверных различий в концентрации глюкозы и инсулина в сыворотке экспериментальных животных, употребление солей железа, особенно на фоне содержания на высокожировой диете, приводит к увеличению концентрации глюкозы и Таблица 4 Влияние солей железа и диеты на концентрацию инсулина и глюкозы в сыворотке крови крыс Wistar Диета Глюкоза, ммоль/л Инсулин, мкЕД/мл СтД 8,50±0,42 3,59±0,21 ВЖД 8,84±0,48 3,53±0,34 Fe+СтД 8,57±1,11 2,74±0,46 Fe+ВЖД 8,96±0,80 4,40±1,21 Примечание: СтД - стандартная диета; ВЖД - высокожировая диета; Fe - диета, дополненная 3 мг/л FeSO4·7H2O с питьевой водой. инсулина, что свидетельствует о развитии инсулинорезистентности, являющейся одним из патогенетических звеньев дисфункции ЖТ и развития метаболического синдрома [2]. ВЫВОД В ходе исследования установлено, что, с одной стороны, сульфат железа приводит к потенцированию адипогенного эффекта высокожировой высококалорийной диеты, а с другой - выступает в качестве фактора, способствующего формированию эндокринной дисфункции жировой ткани (так называемого эндокринного дизраптора).

Об авторах

Алексей Алексеевич Тиньков

Оренбургская государственная медицинская академия

Елизавета Васильевна Попова

Оренбургская государственная медицинская академия

Александр Александрович Никоноров

Оренбургская государственная медицинская академия

Email: nikonorov_all@mail.ru

Список литературы

Дополнительные файлы