Иммуногистохимическая характеристика регионарных лимфатических узлов при раке
- Авторы: Цыплаков Д.Э.1, Петров С.В.1, Шамсутдинов Н.Ш.1
-
Учреждения:
- Казанский государственный медицинский университет
- Выпуск: Том 77, № 5 (1996)
- Страницы: 354-356
- Тип: Теоретическая и клиническая медицина
- Статья получена: 08.03.2022
- Статья одобрена: 08.03.2022
- Статья опубликована: 15.10.1996
- URL: https://kazanmedjournal.ru/kazanmedj/article/view/104605
- DOI: https://doi.org/10.17816/kazmj104605
- ID: 104605
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Лимфатические узлы, регионарные к карциноме различных органов, исследуются иммуногистохимическими методами с использованием моноклоновых антител к CD-антигенам. Установлено, что при метастатическом распространении опухоли интенсивность реакций клеточного иммунитета резко снижается на фоне сохранения гуморальных иммунных реакций. Выявлены факторы, обеспечивающие неэффективность местного иммунитета:
1) снижение количества CD 1 (+) и CD 10 (+) бластных форм, предшественников активированных Т-лимфоцитов;
2) блокада гуморальными антителами CD 20 (+) и антителами-продуцентами Т-клеточного цитотоксического эффекта;
3) дефицит CD 8 (+) Т-супрессоров, способных угнетать продукцию иммуноглобулинов.
Ключевые слова
Полный текст
Реакции органов иммунной системы, и прежде всего регионарных лимфатических узлов, оказывают решающее влияние на течение опухолевого процесса. Однако если в одних случаях барьерная функция лимфоузлов эффективна, то в других — практически не реализуется. Несмотря на значительное число исследований по данной проблеме, вопрос о роли лимфатических узлов при развитии рака остается открытым. Это объясняется не только сложностью предмета, отражающего характер взаимодействий в иммунной системе на клеточном и гуморальном уровнях, но и отсутствием единого методического подхода к изучению лимфоузлов. Предложенная в 1973 г. схема ВОЗ [6] не может отвечать задачам современных исследований в связи с существенной модификацией традиционных методов изучения лимфатических узлов [5] и появлением принципиально новых, прежде всего иммуногистохимических с применением моноклональных антител [9].
Целью настоящей работы являлось иммуногистохимическое изучение регионарных лимфатических узлов в норме и в процессе развития рака, а также определение факторов, способствующих приживлению в лимфоузлах опухолевых клеток.
Были изучены 124 регионарных лимфатических узла, полученных во время операций по поводу рака желудка, легкого, молочной железы, кишечника и пищевода от 30 онкологических больных. В качестве контроля послужили 50 лимфатических узлов тех же регионов, полученные от 10 практически здоровых лиц, погибших от случайных причин (судебно-медицинские вскрытия).
Лимфатический узел вдоль большой оси разрезали на две части. Одну половину использовали для иммуногистохимического исследования, другую — для гистологической окраски азур-II-эозином и пиронином по Браше. Иммуногистохимическое исследование проводили по схеме, разработанной Оксфордским университетом для лимфоретикулярной ткани [81. Применялись моноклональные антитела CD 1 CD 2, CD 3, CD 4, CD 8, CD 10, CD 20, CD 45 и антииммуноглобулины фирм “BioGenex Laboratories” (США), “Dako A/S” (Дания) и “Sigma Immuno Chemicals” (США). После подготовки срезов использовали иммунофлюоресцентный и РАР-методы [9]. Морфометрический анализ клеточных элементов проводили с помощью окулярной сетки Г.Г. Автандилова [1]. Полученный материал был разделен на 3 группы: 1-я — контроль (n = 50), 2-я — лимфоузлы без метастазов рака (70), 3-я — лимфоузлы с наличием метастазов различного объема (54).
Установлено, что при развитии рака до появления в лимфоузлах метастазов происходит увеличение общего числа CD 45(+) лимфоидных клеток (см. табл.). Меняется и качественный состав популяции лимфоцитов. В гиперплазированной паракортикальной зоне возрастает число CD 2(+) и СВ 3(+) Т-клеток (рис. 1), что реализуется за счет CD 4(+) хелперов/индукторов1 и CD 8(+) киллеров/супрессоров*. Кроме того, появляется больше CD 1 (+) и CD 10 (+) незрелых (бластных) форм Т-клеток, которые либо поступают из тимуса, либо образуются в результате бласттрансформации в ответ на опухолевый антиген. Параллельно в корковом плато (фолликулы с реактивными центрами) и в мякотных тяжах возрастает количество CD 20 (+) В-лимфоцитов и антителообразующих плазматических клеток (рис. 2). При наличии метастазов в лимфоузлах иммуногистохимическая картина существенно меняется. Несмотря на сохранение общей клеточности CD 45 (+) лимфоидной ткани, происходит уменьшение процента CD 2 (+) и CD 3 (+) Т-клеток, а также CD 1 (+) и CD 10 (+) бластов, CD 4 (+) хелперов/индукторов, CD 8(+) киллеров/супрессоров. В то же время число CD 20 (+) В-лимфоцитов и антителообразующих плазмоцитов остается большим.
Рис. 1 Высокое содержание CD 2 (+) и CD 3 (+) Т-лимфоцитов в гиперплазированной паракортикальной зоне. PAP-метод X 100.
Рис. 2. Антителообразующие клетки в мякотных тяжах. Иммунофлюоресцентный метод, х 400.
Таблица. Иммуногистохимическая характеристика клеточных элементов лимфатического узла в норме и при развитии рака (в % от общего количества клеток; М±m)
Группы наблюдений | CD 45(+) общее количество лимфоцитов | CD 1 (+) и CD 10 (+) незрелые Т-клетки, лимфобласты | CD 2 (+) и CD 3 (+) Т-лимфоциты | CD 4 (+) Т-хелперы и T-индукторы | CD 8 (+) T-киллеры и Т-супрессоры | CD 20 (+) В-лимфоциты | Продуценты антител |
1-я (контроль) | 71,4±0,72 | 5,1±0,23 | 34,6±0,53 | 21,6±0,20 | 15,6±0,09 | 18,3±0,22 | 2,5±0,13 |
2-я | 76,8±0,95 | 9,6±0,19 | 42,5±0,58 | 29,4±0,26 | 20,7±0,14 | 26,5±0,41 | 10,4±0,12 |
Р | < 0,05 | < 0,05 | < 0,05 | < 0,05 | < 0,05 | < 0,05 | < 0,05 |
3-я | 75,3±0,57 | 5,3±0,33 | 30,7±0,16 | 19,5±0,18 | 14,6±0,11 | 24,4±0,29 | 9,4±0,15 |
Р1 | < 0,05 | > 0,05 | < 0,05 | > 0,05 | > 0,05 | < 0,05 | < 0,05 |
Р2 | > 0,05 | < 0,05 | < 0,05 | < 0,05 | < 0,05 | > 0,05 | > 0,05 |
Примечание. Р — разница между данными 2-й группы и контролем, Р1 — между данными 3-й группы и контролем, Р2 — между данными 2 и 3-й групп.
Таким образом, в регионарных лимфатических узлах при развитии рака вначале происходит активация как Т-, так и В-клеточной систем иммунитета. Причем увеличение CD 8 (+) киллерно-супрессорной популяции реализуется в основном за счет цитотоксических клеток. Это следует из того факта, что Т-супрессоры угнетают продукцию иммуноглобулинов разных классов [3], а поскольку в лимфоузлах при раке гуморальные иммунные реакции с высокой антителообразующей способностью клеток остаются на высоком уровне, то, вероятно, увеличения числа Т-супрессоров не происходит. Данный вывод подтверждается и ультраструктурными исследованиями, в которых показано увеличение количества цитотоксических Т-киллеров в лимфоузлах на ранних стадиях рака [4]. Подобная реакция регионарных лимфатических узлов при наличии Т-киллеров, а также хелперов и индукторов, усиливающих их действие, тормозит на какое-то время процесс метастазирования. Поддерживается популяция активированных Т-клеток за счет поступления из тимуса молодых форм и при помощи реакции бласт- трансформации — CD 1 (+) и CD 10 (+) клетки. В дальнейшем интенсивность Т-клеточных иммунных реакций резко снижается, при наличии же метастазов в лимфоузлах они практически не выражены, что определяется и на ультраструктурном уровне [4]. Все это приводит к генерализации опухолевого процесса, чему способствует ряд факторов: во-первых, это уменьшение числа CD 1 и CD 10(+) ранних (бластных) форм, возможно, как результат микро- циркуляторных расстройств [2], которые блокируют рециркуляцию через посткапиллярные венулы; во-вторых, блокада гуморальными антителами — CD 20 (+) и антииммуноглобулинпозитивными клетками — Т-клеточного цитотоксического эффекта [7] и, в-третьих, недостаток Т-супрессоров, которые контролируют дифференцировку В-клеток и угнетают продукцию иммуноглобулинов [3].
[1] В настоящее время не разработаны антитела, способные разделить хелперы и индукторы, а также киллеры и супрессоры.
Об авторах
Д. Э. Цыплаков
Казанский государственный медицинский университет
Автор, ответственный за переписку.
Email: info@eco-vector.com
Россия, Казань
С. В. Петров
Казанский государственный медицинский университет
Email: info@eco-vector.com
Россия, Казань
Н. Ш. Шамсутдинов
Казанский государственный медицинский университет
Email: info@eco-vector.com
Россия, Казань
Список литературы
- Автандилов Г. Г. Медицинская морфометрия. — М., 1990.
- Баикеев Р.Ф., Цыплаков Д.Э., Бубякин А.Н. и соавт. // Гематол. и трансфузиол. — 1993. — № 2. — С. 26—31.
- Петров Р.В., Хаитов Р.М. Гомеостаз. — М., 1981.
- Цыплаков Д.Э., Петров С.В.// Казанский мед. ж. — 1990. — № 4. — С. 302—303.
- Audouin J., Diebold J.// Ann. pathol. — 1983. Vol. 3. — P. 175—181.
- Cottier H., Turk J., Sobin L.// Бюлл. BO3. — 1973. — T.47. — C. 372—377.
- Hellstrom K.E., Hellstrom I.//Adv. Immunol. — 1974. — Vol. 18. — P. 209—277.
- Isaacson P.G. Lymphoreticular tissues. In.: Oxford Textbook of Pathology. — 1992. — Vol. 2b. — P. 1745—1762.
- Taylor C.R., Cote R.J. Immunomicroscopy: A Diagnostic Tool for the Surgical Pathologist. — Copyright, 1994, by W.G. Saunders Company.
Дополнительные файлы
![](/img/style/loading.gif)