Обоснование. Жидкостная биопсия является перспективным методом анализа опухолевого генетического материала в плазме и цереброспинальной жидкости. Эти биологические среды характеризуются низкой концентрацией данного материала. Предполагается, что предварительная амплификация может повысить чувствительность анализа.

Цель исследования. Оценить выявляемость и содержание внеклеточного опухолевого генетического материала в плазме и ликворе пациентов с глиомами с помощью цифровой капельной полимеразной цепной реакции без и с использованием преамплификации.

Методы. В исследование включены образцы плазмы и цереброспинальной жидкости 25 пациентов с впервые установленной глиомой, которым была назначена операция по частичному или полному удалению опухоли. ДНК выделяли из 2,5–5 мл ликвора и 5 мл плазмы. Каждый образец анализировали с помощью цифровой капельной полимеразной цепной реакции на наличие мутаций генов IDH1 R132H и промотора TERT C228T и C250T. Поиск мутаций проводили как в растворе выделенной ДНК, так и в растворе после предварительной амплификации. Порог ложноположительных сигналов устанавливали в серии экспериментов с анализом образцов дикого типа и отрицательного контроля без матрицы. При статистической обработке для сравнения парных данных использовали критерии Манна–Уитни и Уилкоксона, для определения корреляционных связей — критерий Спирмена.

Результаты. Чувствительность и специфичность жидкостной биопсии ликвора без преамплификации составили 14,3 и 100% для пациентов с глиомами степени злокачественности 1–3 и 50 и 100% для пациентов с глиомами степени 4. После преамплификации данные значения составили 57,1 и 50% для глиом степени 1–3 и 75 и 80% для глиом степени 4. Отмечена значимая взаимосвязь между уровнями внеклеточной ДНК и объёмом, степенью злокачественности опухоли, а также характером её контрастного накопления (отсутствие, умеренное/неравномерное, интенсивное, кольцевидное).

Заключение. Жидкостная биопсия с предварительной амплификацией ДНК обладает ограниченными чувствительностью и специфичностью в выявлении глиом, однако позволяет оценивать важные характеристики опухоли, что может быть полезно для выбора терапевтической тактики.

论证：液体活组织检查是分析血浆和脑脊液中肿瘤遗传物质的有希望的方法。这些生物介质的特征在于这种材料的低浓度。假定预扩增可增加分析的灵敏度。

目的：利用数字液滴聚合酶链反应不使用和使用预扩增评价神经胶质瘤患者血浆和脑脊液中细胞外肿瘤遗传物质的可检测性和含量。

方法：该研究包括来自25名新诊断的神经胶质瘤患者的血浆和脑脊液样本，这些患者接受手术以部分或完全切除肿瘤。从2.5-5ml脑脊液和5ml血浆中分离DNA。使用数字液滴聚合酶链式反应分析每个样品是否存在IDH1 R132H基因和TERT C228T和C250T启动子中的突变。在分离的DNA溶液中和预扩增后的溶液中进行突变搜索。假阳性信号的阈值在一系列实验中设定，分析野生型样品和没有基质的阴性对照。在统计处理中，使用曼-惠特尼和威尔科森标准来比较配对数据，并使用斯皮尔曼标准来确定相关性。

结果：未经预扩增的液体脑脊液活检的敏感性和特异性对于1-3级神经胶质瘤患者为14.3和100％，对于4级神经胶质瘤患者为50和100％。预扩增后，这些值对于1-3级胶质瘤分别为57.1和50％，对于4级胶质瘤分别为75和80％。注意到细胞外DNA水平与肿瘤的体积，恶性程度以及其对比积累的性质（不存在，中度/不均匀，强烈，环形）之间存在显着关系。

结论：具有DNA预扩增的液体活检在检测胶质瘤方面具有有限的敏感性和特异性，但它使我们能够评估肿瘤的重要特征，这可能对选择治疗策略有用。