Aim. To study the effect of L-arginine and its analogue N-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) alone and in combination on lysosomal cysteine proteolysis and lysosomal membranes state in rat aorta.
Methods. The study was performed on male Wistar rats kept under standard vivarium conditions and divided into three control and three experimental groups of 8 animals each. The experimental samples included groups with L-arginine and/or L-NAME administration. The indicators were studied in the rat aorta homogenate precipitating and non precipitating fractions. Acid phosphatase activity was determined by a standardized method of «end point», the cathepsins B, L and H activity was studied by spectrofluorimetric method.
Results. When simulating the changes of nitric oxide synthesis level using L-arginine, the increase of the total cathepsins activity was detected, acid phosphatase lability coefficient was reduced, what is characterized by general lysosomal membranes stabilization. L-NAME group, in contrast, is characterized by a decrease in the cathepsin B and H activity indicators, differences from arginine group were observed in the cathepsin H in lysosomal and general fractions, lysosomal membrane is labile. Combined drugs administration reduces the total cathepsins activity, while there is an increase of the acid phosphatase total activity, all indicators suggest lysosomal membranes labilization.
Conclusion. L-arginine at a dose of 500 mg/kg causes increase in the total cathepsins B, L and H activity in rat aorta due to lysosomal fraction; L-arginine action leads to lysosomal membranes stabilization; L-NAME group in cathepsin H shows a decrease in the cathepsins secretion level with decreased total activity due to both factions; combined administration of arginine + L-NAME group in cathepsin B is characterized by an increase in secretion due to lysosomes membrane labilization.
Цель. Изучить влияние L-аргинина и его аналога N-нитро-L-аргинин-метилового эфира (L-NAME) по отдельности и в комбинации на лизосомальный цистеиновый протеолиз и состояние лизосомальных мембран в аорте крыс.
Методы. Исследование было выполнено на крысах-самцах линии Wistar, содержавшихся в типовых условиях вивария и разделённых на три контрольные и три экспериментальные группы, по 8 особей в каждой. Экспериментальные выборки включали группы с введением L-аргинина и/или L-NAME. Показатели изучали в осаждаемой и неосаждаемой фракциях гомогената аорты крыс. Активность кислой фосфатазы определяли унифицированным методом по «конечной точке», активность катепсинов В, L и Н изучали спектрофлуориметрическим методом.
Результаты. При моделировании изменения уровня синтеза оксида азота с помощью L-аргинина обнаружено нарастание общей активности катепсинов, коэффициент лабильности у кислой фосфатазы снижается, что характеризуется общей стабилизацией лизосомальных мембран. Группа L-NAME, напротив, характеризуется снижением показателей активности катепсинов В и Н, отличия от группы аргинина отмечены у катепсина Н в лизосомальной и общей фракциях, мембрана лизосом лабильна. Сочетанное введение препаратов снижает общую активность катепсинов, при этом происходит повышение общей активности кислой фосфатазы, все показатели свидетельствуют о лабилизации лизосомальных мембран.
Вывод. L-аргинин в дозе 500 мг/кг вызывает нарастание общей активности катепсинов В, L и Н в аорте крыс за счёт лизосомальной фракции; действие L-аргинина приводит к стабилизации лизосомальных мембран; группа L-NAME у катепсина Н демонстрирует уменьшение степени секреции катепсинов со снижением общей активности за счёт обеих фракций; группа сочетанного воздействия аргинин + L-NAME у катепсина В характеризуется увеличением секреции за счёт лабилизации мембраны лизосом.