Kazan medical journalKazan medical journalКазанский медицинский журнал0368-48142587-9359Eco-Vector2040110.17816/KMJ2020-145Clinical experiencesОбмен клиническим опытомResearch ArticleFeatures of immunophenotypic finding B-cell lymphoproliferative diseases by flow cytometryОсобенности иммунофенотипической диагностики В-клеточных лимфопролиферативных заболеваний методом проточной цитометрииChuksinaJ JЧуксинаЮлия Юрьевна
Russian Federation
tchuxina2009@yandex.ruKataevaE VКатаеваЕлена Васильевна
Russian Federation
tchuxina2009@yandex.ruMitinaT AМитинаТатьяна Алексеевна
Russian Federation
tchuxina2009@yandex.ruMoscow Regional Scientific and Research Clinical Institute named after M.F. VladimirskiyМосковский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского1102202010111451521002202010022020Copyright ©; 2020, Chuksina J.J., Kataeva E.V., Mitina T.A.Copyright ©; 2020, Чуксина Ю.Ю., Катаева Е.В., Митина Т.А.2020Chuksina J.J., Kataeva E.V., Mitina T.A.Чуксина Ю.Ю., Катаева Е.В., Митина Т.А.http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0https://kazanmedjournal.ru/kazanmedj/article/view/20401

Aim. To assess the information content of conventional and additional immunophenotypic markers (CD200, CD305) in the differential diagnosis B-cell lymphoproliferative diseases by flow cytometry.

Methods. An immunophenotypic study using 4-color flow cytometry was performed in 204 patients with diffe­rent variants of B-cell non-Hodgkin's lymphomas. The study material included peripheral blood and bone marrow. The expression of CD45, CD19, CD20, CD22, CD79b, CD79a, CD5, CD10, CD23, FMC7, CD43, CD38, CD11c, CD103, CD25, CD 200, CD 305, light chains of immunoglobulins (kappa/lambda) using monoclonal antibodies (Becton Dickinson, USA) was evaluated. The intensity of antigen expression was assessed using mean fluorescence intensity (y. e.).

Results. Conventional FMC7-positive expression revealed only half patients with different variants of leu­kemization of non-Hodgkin's lymphomas, whereas atypical positive expression of CD23 was observed in patients with marginal spleen lymphoma and follicular lymphoma in 27.3 and 28.6% of cases, respectively. In mantle cell lymphoma, expression of CD200 in B-cell was detected in a significantly smaller number of observations, accompanied by a significant decrease in the average intensity of CD200 fluorescence compared to B-cell chronic lymphocytic leukemia (B-CLL) cells. The mean fluorescence intensity (MFI) of CD305 in hairy cell leukemia is significantly higher than in splenic marginal zone lymphoma (SMZL) with “villous” lymphocytes.

Conclusion. Different levels of the information content of some conventional markers were revealed in differential immunophenotypic diagnosis of B-cell lymphoproliferative diseases by flow cytometry; the use of additio­nal markers CD200 and CD305 was highly informative in differential diagnostics between different variants of B-cell lymphoproliferative diseases with similar immunophenotypic and morphological characteristics of lymphoid elements.

Цель. Оценить информативность традиционных и дополнительных маркёров (CD200, CD305) при иммунофенотипической диагностике у пациентов с В-клеточными лимфопролиферативными заболеваниями методом проточной цитометрии.

Методы. Иммунофенотипическое исследование методом четырёхцветной проточной цитометрии проведено 204 пациентам с различными вариантами В-клеточных неходжкинских лимфом. Материалом для исследования служили периферическая кровь и костный мозг. Оценивали экспрессию CD45, CD19, CD20, CD22, CD79b, CD79a, CD5, CD10, CD23, FMC7, CD43, CD38, CD11c, CD103, CD25, CD200, CD305, лёгких цепей иммуноглобулинов (kappa/lambda) с помощью моноклональных антител (Becton Dickinson, США). Оценку интенсивности экспрессии антигенов проводили по параметру средней интенсивности флюоресценции (y.e.).

Результаты. Традиционная позитивная экспрессия FMC7 выявлена только у половины пациентов с различными вариантами лейкемизации неходжкинских лимфом, в то время как нетипичная позитивная экспрессия CD23 отмечена у пациентов с лимфомой маргинальной зоны селезёнки и фолликулярной лимфомой в 27,3 и 28,6% случаев соответственно. При лимфоме из клеток мантийной зоны позитивная экспрессия СD200 выявлена в значительно меньшем количестве наблюдений, что сопровождалось и достоверным снижением средней интенсивности флюоресценции СD200 по сравнению с опухолевыми клетками В-клеточного хронического лимфолейкоза. Показатель средней интенсивности флюоресценции СD305 при волосатоклеточном лейкозе достоверно выше, чем при лейкемизации лимфомы маргинальной зоны селезёнки c «ворсинчатыми» лимфоцитами.

Вывод. Выявлена различная степень информативности некоторых традиционных маркёров при иммунофенотипической диагностике В-клеточных лимфопролиферативных заболеваний методом проточной цитометрии; использование дополнительных маркёров СD200 и СD305 показало их высокую информативность при дифференциальной диагностике между различными вариантами В-клеточных лимфопролиферативных заболеваний со сходной иммунофенотипической и морфологической характеристиками лимфоидных элементов.

B-cell lymphoproliferative diseasesflow cytometryСD200СD305 markersВ-клеточные лимфопролиферативные заболеванияпроточная цитометриямаркёры СD200СD305WHO Classification of Tumours of Haematopoe­tic and Lymphoid Tissues. Ed. S.H. Swerdlow, E. Campo, N.L. Harris et.al. Lyon. 2017; 585 р.Lugovskaya S.A., Kisilichina D.G., Pochtar M.E. et al. New markers (CD160, CD200, and LAIR-1) in diagnosis of B-cell lymphoproliferative disorders. Klinicheskaya onkogematologiya. Fundamental'nye issledovaniya i klinicheskaya praktika. 2013; 6 (1): 45–53. (In Russ.)Луговская С.А., Кисиличина Д.Г., Почтарь М.Е. и др. Новые маркёры (CD160, CD200, LAIR-1) в диагностике В-клеточных лимфопролиферативных заболеваний. Клин. онкогематол. Фудаментал. исслед. и клин. практика. 2013; 6 (1): 45–53.Palumbo G.A., Parrinello N., Fargione G. et al. CD200 expression may help in differential diagnosis between mantle cell lymphoma and B-cell chronic lymphocytic leukemia. Leuk. Res. 2009; 33 (9): 1212–1216. DOI: 10.1016/j.leukres.2009.01.017.Brunetti L., Di Noto R., Abate G. et al. CD200/OX2, a cell surface molecule with immuno-regulatory function, is consistently expressed on hairy cell leukaemia neoplastic cells. Br. J. Haematol. 2009; 145 (5): 665–667. DOI: 10.1111/j.1365-2141.2009.07644.x.Sander B. Mantle cell lymphoma: recent insights into pathogenesis, clinical variability, and new diagnostic markers. Semin. Diagn. Pathol. 2011; 28 (3): 245–255. DOI: 10.1053/j.semdp.2011.02.010.Moreaux J., Hose D., Reme T., Jourdan E. CD200 is a new prognostic factor in multiple myeloma. Blood. 2006; 108 (13): 4194–4197. DOI: 101182/blood-2006-06-029355.Olteanu H., Harrington A.M., Parameswaran H., Kroft S.H. CD200 expression in plasma cell myeloma. Br. J. Haematol. 2011; 153: 408–411. DOI: 10.1111/j.1365-2141.­2010.08555.x.Desoukey N.A., Afify R.A., Amine D.G., Mohammed R.F. CD200 expression in B-cell chronic lymphoproliferative disorders. J. Investig. Med. 2012; 60: 56–61. DOI: 10.2310/JIM.0b013e31823908f9.Brondijk C., de Ruiter T., Ballering J. et al. Crystal structure and collagenbinding site of immune inhibitory receptor LAIR-1: unexpected implications for collagen bin­ding by platelet receptor GPVI. Blood. 2010; 115 (7): 1364–1373. DOI: 10.1182/blood-2009-10-246322.Meyaard L. The inhibitory collagen receptor ­LAIR-1 (CD305). J. Leuk. Biol. 2008; 83: 799–803. DOI: 10.1189/Jeb.0907609.Alfarano A., Indraccolo S., Circosta P. et al. An alternatively spliced form of CD79b gene may account for altered B-cell receptor expression in B-chronic lymphocytic leukemia. Blood 1999; 93 (7): 2327–2335. PMID: 10090943.Krober A., Seiler T., Benner A. et al. V(H) mutation status, CD38 expression level, genomic aberrations, and survival in chronic lymphocytic leukemia. Blood. 2002 (100): 1410–1416. PMID: 12149225.Quijano S., López A., Rasillo A. et al. Impact of trisomy 12, del(13q), del(17p), and del(11q) on the immunophenotype, DNA ploidy status, and proliferativerate of leukemic B-cells in chronic lymphocytic leukemia. Cytometry. Part B. Clin. Cytom. 2008; 74B (3): 139–149. DOI: 10.1002/cyto.b.20390.Muzio M., Scielzo C., Bertilaccio M.T. et al. Expression and function of toll like receptors in chronic lymphocytic leukaemia cells. Br. J. Haematol. 2009; 144 (4): 507–516. DOI: 10.1111/j.1365-2141.2008.07475.x.Chuksina Y.Y., Yazdovskiy V.V., Shevelev S.V. et al. Prognostic significance of immunophenotypic markers in the evaluation of minimal residual disease in patients with chronic lymphocytic leukemia after immunochemotherapy. Rossiyskiy immunologicheskiy zhurnal. 2015; 9 (3-1): 236–238. (In Russ.)Чуксина Ю.Ю., Яздовский В.В., Шевелёв С.В. и др. Прогностическая значимость иммунофенотипических маркёров при оценке минимальной остаточной болезни у больных хроническим лимфолейкозом после проведения иммунохимиотерапии. Рос. иммунол. ж. 2015; 9 (3-1): 236–238.Katzenberger T., Kalla J., Leich E. et al. A distinctive subtype of t(14;18)-negative nodal follicular non-Hodgkin lymphoma characterized by a predominantly diffuse growth pattern and deletions in the chromosomal region 1p36. Blood. 2009; 113 (5): 1053–1061. DOI: 10.1182/blood-2008-07-168682.