Aim. To perform quantitative analysis and immunohistochemical phenotyping of regional lymph nodes structural and cellular elements in gastric cancer in the absence and the presence of metastases.
Methods. The regional lymph nodes obtained during surgery for gastric cancer from 48 patients (31 men and 17 women, mean age 60.9 years) were studied. Histological sections were stained with haematoxylin and eosin, van Gieson stain, azure-II-eosin, pyronin by Brashe. Then morphometric analysis of lymph nodes structural and cellular elements was performed. A set of monoclonal antibodies against CD45, CD3, CD4, CD8, CD10, CD20, CD30, BLA-36, immunoglobulin (Ig) λ- and κ-chains, CD56, myeloperoxidase, CD68, lysozyme, α1-antichymotrypsin, CD35, S100, Ki-67, CD31, collagen type IV, vimentin, desmin was used for immunohistochemical reactions. Comparative study was performed in the following groups: (1) control group; (2) lymph nodes without metastases; (3) lymph nodes with metastases of different size.
Results. Paracortical and follicular hyperplasia, sinus histiocytosis, microcirculatory disorders and fibroplastic processes were found in regional lymph nodes in gastric cancer development. Paracortical hyperplasia was characterized by following immunohistochemical phenotype: CD 45, CD 3, CD 4, CD 8, CD 10, CD 30, CD 56, S 100, CD 31, Ki-67. CD45, CD20, BLA-36, CD10, CD30, CD35, Ig λ- and κ-chains, Ki-67 were mainly expressed in follicular hyperplastic reaction. The sinus reaction was accompanied by total cellularity increase with a predominance of CD68(+), α1-antichymotrypsin(+) and lysozyme(+) cells. Expression of CD3, CD4, CD8, CD10, CD56, Ki-67 decreased amid the paracortical zone area reduce in metastases development. Sinuses were devastated and poor with cellular elements, often with lymphostasis or sclerosis signs. Imunohistochemically there was moderate reaction with monoclonal antibodies against α1-antichymotrypsin, low - against lysozyme, myeloperoxidase, and high - against vimentin. Wherein follicular hyperplasia with high levels of CD20(+) B-cells, BLA-36(+) activated lymphocytes and Ig(+) antibody producing plasma cells persisted. At the same time microcirculatory disorders and fibroplastic processes progressed.
Conclusion. Structural components area ratio, cellular composition and immunohistochemical phenotype change in the regional lymph nodes in gastric cancer development, with significant differences between intact and affected lymph nodes; paracortical zone and sinuses area reduction with T-, NK-cells and macrophage markers expression decrease amid the preservation of follicular hyperplasia with high level of activated B lymphocytes and antibody producing plasma cells can promote metastases engrafment in lymph nodes and further cancer generalization.
Цель. Количественный анализ и иммуногистохимическое фенотипирование структурных и клеточных элементов лимфатических узлов, регионарных к раку желудка, при отсутствии и наличии в них метастазов.
Методы. Изучены регионарные лимфатические узлы, полученные во время операций по поводу рака желудка от 48 больных (31 мужчины и 17 женщин, средний возраст которых составил 60,9 года). Гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином, по ван Гизону, азур-II-эозином, пиронином по Браше. Затем проводили морфометрический анализ структурных и клеточных элементов лимфатического узла. Для иммуногистохимических реакций использовали набор моноклональных антител против CD45, CD3, CD4, CD8, CD10, CD20, CD30, BLA-36, λ- и κ-цепей иммуноглобулинов (Ig), CD56, миелопероксидазы, CD68, лизоцима, α1-антихимотрипсина, CD35, S100, Ki-67, CD31, коллагена IV типа, виментина, десмина. Сравнительное исследование проводили в следующих группах: (1) контроль, (2) лимфатические узлы без метастазов, (3) лимфатические узлы с метастазами различного объёма.
Результаты. При развитии рака желудка в регионарных лимфатических узлах обнаруживались паракортикальная и фолликулярная гиперплазия, синусный гистиоцитоз, а также микроциркуляторные расстройства и фибропластические процессы. Паракортикальная гиперплазия иммуногистохимически характеризовалась следующим фенотипом: CD45, CD3, CD4, CD8, CD10, CD30, CD56, S100, CD31, Ki-67. При гиперпластической фолликулярной реакции преимущественно экспрессировались CD45, CD20, BLA-36, CD10, CD30, CD35, λ- и κ-цепи Ig, Ki-67. Реакция синусов сопровождалась увеличением общей клеточности с преобладанием CD68(+), α1-антихимотрипсин(+) и лизоцим(+) клеток. При появлении метастазов на фоне уменьшения площади паракортикальной зоны происходило снижение экспрессии CD3, CD4, CD8, CD10, CD56, Ki-67. Синусы были опустошены и бедны клеточными элементами, зачастую с явлениями лимфостаза или склероза. Иммуногистохимически в них определялась умеренная реакция с моноклональными антителами против α1-антихимотрипсина, низкая - против лизоцима, миелопероксидазы, высокая - против виментина. При этом сохранялась фолликулярная гиперплазия с высоким содержанием CD20(+) В-клеток, BLA-36(+) активированных лимфоцитов и Ig(+) антителообразующих плазмоцитов. Параллельно прогрессировали микроциркуляторные расстройства и фибропластические процессы.
Вывод. В регионарных лимфатических узлах при развитии рака желудка меняются соотношение площадей структурных компонентов, клеточный состав и иммуногистохимический фенотип, при этом есть существенные различия между интактными и поражёнными лимфатическими узлами; уменьшение площади паракортикальной зоны и синусов со снижением экспрессии Т-, NK-клеточных и макрофагальных маркёров на фоне сохранения фолликулярной гиперплазии с высоким содержанием активированных В-лимфоцитов и антителообразующих плазматических клеток может способствовать приживлению в лимфатических узлах метастазов и дальнейшей генерализации опухолевого процесса.